人间充质干细胞培养试剂盒

仅用于对人间充质干细胞的增殖培养，不具备对细胞的选择、诱导、分化功能。培养后的细胞用于体外诊断。

人间充质干细胞培养试剂盒是一款无血清的人间充质干细胞培养产品。用于人间充质干细胞的原代分离和增殖培养，并保持其三系中胚层分化潜能。本产品不含血清，可有效避免因血清质量和血清组分变动对实验造成影响，提高细胞培养和实验结果的可重复性。

产品参数

储存条件及有效期

本试剂盒分为两组分，分别具有不同的储存要求：

• 人间充质干细胞基础培养基 2℃~8℃避光储存，有效期为1 年；
• 人间充质干细胞培养添加物-15℃~-25℃避光保存，有效期为1 年；
• 两者混合后置于 2℃~8℃保存，建议 2 周内使用完。

产品特性

• 无血清培养基；
• 适用于多种组织来源的人间充质干细胞的培养，如脐带、骨髓、脂肪来源的hMSCs原代分离和后续扩增传代培养，培养后细胞可供生产或科研使用； 扩增效率高，节省培养时间；用于后续制造和实验室使用2 / 3 REV：C/4 维持 hMSCs 三系分化能力；
• 培养过程中无需包被培养板。

使用方法

培养基配制：

1. 准备 25 mL 的人间充质干细胞培养添加物，37℃水浴解冻，若有沉淀析出，可用0.22μm细胞滤器过滤或 4℃，3000 g/10 min 离心取上清，该步骤不影响实验结果；
2. 准备 475 mL 的人间充质干细胞基础培养基，恢复到室温；
3. 将人间充质干细胞培养添加物加入 475 mL 人间充质干细胞基础培养基中，即可得到5%浓度的完全培养基；
4.  配置好的人间充质干细胞完全培养基可于 2℃~8℃保存2 周。

提示：如有需要，使用者可按照比例配制所需用量，也可自行添加抗生素，如将青霉素/链霉素按 1:100 的稀释倍数加入完全培养基中。

细胞培养：

1. 取复苏或传代收获的人间充质干细胞（hMSCs），进行计数；

2. 添加本培养基至所需要的细胞浓度，接种到培养瓶中（一般建议接种浓度为0.7×10⁴~1.0×10⁴/cm²）培养；

3. 培养条件：5％CO2，37℃；

4. 根据细胞生长情况，每 2~3 天换液一次，等细胞长至80%~90%汇合度时可进行消化；

5. 消化方法：将培养瓶中的培养基倒出，使用 DPBS 或生理盐水将贴壁的细胞清洗2遍；建议使用 0.05%胰酶或胰酶替代物（如达优胰酶消化液）铺满培养瓶底，37℃培养箱内孵育1 min~3 min，加入人间充质干细胞完全培养基终止消化，将细胞悬液转入离心管，210×g离心 4 min，沉淀即为所需细胞；

6. 将细胞计数后按需要直接收获或继续接种培养。

注意事项

• 本品应由专业人员使用，使用前应仔细阅读说明书，并做好个人卫生防护； 整个实验注意无菌操作；
• 混匀细胞时，请尽量吹打混匀，避免细胞成团；
• 试剂储存时，避免高温、低温环境及日光照射；试剂使用时请注意无菌操作；
• 有效期内使用；
• 废液的处理应按国家或其他相关规定进行。