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- 2026年08月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
保存在常温(RT)，避光，2年。
- 保质期：
保存在常温(RT)，避光，2年。
- 英文名：
Rat Peripheral Blood Neutrophil Isolation Solution Kit
- 库存：
999
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- 规格：
200ml/Kit
注意：本产品试剂组分和操作步骤发生变化，使用前请仔细阅读说明书。
保存：本产品对光敏感，应该室温避光储存，保质期 2 年。无菌开封后，保存于室温。
试剂盒组成：
试剂 A 200mL 室温避光
试剂 C 100mL 室温避光
红细胞沉降液 100mL 室温
细胞洗涤液 200mL 室温
操作步骤一：
红细胞沉降（仅供参考） 沉降去除红细胞：取新鲜抗凝血与血液稀释液(注射用生理盐水或 1XPBS)及红细胞沉降液按照 1:1:1 比例混匀，室温下静置 30-40min 后，可见红细胞沉于试管底部，小心吸取上清层(富含白细胞及血 小板)用于后续细胞分离。
操作步骤二：
样本分离（仅供参考）
1. 样本分离：当样本体积小于 5mL 时,先在离心管中先加入 4mL 试 剂 A，后将 2mL 试剂 C 小心叠加于试剂 A 之上，形成梯度界面(样本 体积大于等于 5mL，试剂 A 与试剂 C 比例 2:1，试剂总量等于沉降后 样本含量),将悬液小心平铺于分离液液面上方。由于密度差异，可见 明显的分层界面(注意二者的总体积不能超过离心管的三分之二，否则 会影响分离效果)。
2. 室温条件下水平转子 600-1000g ，25-30min(血液体积越大所需离心力越大,离心时间越长,最佳分离条件需摸索，离心最大转速不超过 1000g)。
3. 离心后，离心管中可见两个环状乳白色层，上层为单个核细胞层,下层即所需中性粒细胞层(受 个体差异及分离条件影响，粒细胞白膜层可能会出现颜色较浅的情况)。
4. 用吸管吸取下层中性粒细胞白膜层至新的离心管中，加入 10mL 细胞清洗液洗涤细胞，250g，离 心 10min。
5. 弃上清,加入 5mL 细胞清洗液重悬细胞,250g，离心 5min。
6. 弃上清，重悬细胞备用。
注意事项：
A.开封前颠倒混匀，本分离液为无菌产品，为延长分离液保存时间，请在无菌条件下启封，避免 微生物污染。
B.分离液使用时应始终保持室温（18℃~25℃），如室内温度较低，可将分离液预热。4℃或者是 温度较低的条件下离心，可能会导致白膜层不清晰。
C.血液样本最好为新鲜抗凝血（采血 2h 以内），为保持中性粒细胞的活性，应避免冷冻和冷藏。
D.稀释血液或洗涤细胞，不可使用含 Ca、Mg 离子的缓冲液及培养液，其成分会导致血细胞凝集， 大大降低细胞得率及纯度。
E.部分塑料制品（如聚苯乙烯）因其带有的静电作用，可能会导致细胞挂壁，影响分离效果。
F.血液样本的粘稠度或者是温度差异，可能会影响分离效果，可以调节离心转数和离心时间，摸索 最佳的分离条件。
G.如果要进一步对分离的细胞进行培养，注意全程保持无菌操作，避免微生物污染。
H.不同动物血液在不同比重分离液中的细胞离散系数及细胞带电不同，用户在制定分离液时应提 供所需分离液的比重、动物种属及被分离细胞的名称。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗大鼠 NE 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 NE 与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠 NE ，形成免疫复合物连接在板上，辣根
试验。 3 注意事项 1） 血液新鲜程度是影响分离效果的关键因素，请尽量使用采集后24h内的血液进行PBMC分离。 2） 为保证细胞的活力，整个操作过程请轻柔，避免对细胞造成机械性的损伤。 3） 为保持细胞状态良好，请尽量缩短整个试验的周期。 4 动员外周血单个核细胞分离试剂盒 IPHASE/汇智和源针对动员外周血单个核细胞分离的特点，开发了对应的单个核细胞分离试剂盒。该试剂盒包含单个核细胞分离液和洗涤液两个组分，各成分对细胞无毒性，不会影响细胞的原始状态
Ficoll （2）取抗凝外周血（全血）与无菌 PBS 按照 1:1 充分混匀，用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，动作一定要轻，注意保持清楚的界面。外周血，PBS，淋巴细胞分离液最终体积比为 1:1:1。 （3）水平离心 400 g 成×30 分钟（可根据淋巴细胞分离液 Ficoll 或离心机转子要求调整） （4）离心后可看见管内分为三层，上层为血浆和 PBS，下层主要为红细胞和粒细胞，中层为淋巴细胞分离液。在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带，主要就是单个核细胞，包括淋巴细胞与单核
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