- ￥1380
- 普利莱
- 北京
- E1018
- 2026年01月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4°保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
//
- 库存：
大量
- 供应商：
北京普利莱基因技术有限公司
- CAS号：
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- 规格：
250次
描述：血浆中的脂质以脂蛋白-胆固醇-甘油三酯复合物形式存在。由肝脏生成的极低密度脂蛋白复合物(VLDL)，因富含甘油三酯而密度很低；随着其甘油三酯逐渐水解利用，VLDL 变成 IDL 复合物并失去 Apo E 和Apo C2，转变成为富含 Apo B100 和胆固醇的 LDL 复合物。血低密度脂蛋白 LDL 携带大量胆固醇，与动脉粥样硬化形成正相关，是导致动脉粥样硬化的危险因素。临床常规血脂检验包括四项：总胆固醇(total cholesterol，TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C)和高密度脂蛋白-胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)、甘油三酯(triglyceride，TG)。血浆总胆固醇包括2/3的胆固醇酯和1/3的游离胆固醇。LDL/VLDL-C的测定需要预先分离不同密度的脂蛋白复合物，再测定其中的胆固醇含量。
原理：试剂盒采用世界卫生组织(WHO)、美国FDA、中国《全国临床检验操作规程》推荐的HDL分离方法和胆固醇测定方法，操作简便可靠，灵敏度高，检测范围20~5000 µmol/L，重复性佳。采用CHOD-PAP终点法结合经典GPO Trinder酶学反应1：(1) 胆固醇酯酶分解胆固醇酯为游离胆固醇。(2) 胆固醇氧化酶将游离胆固醇氧化。(3) 反应过程产生过氧化氢。
组成：（250次）
(1) LDL/VLDL捕获剂 13ml
(2) R1 40ml
(3) R2 10ml
(4) 5 mmol/L胆固醇标准品 0.5ml
4ºC保存，6个月有效
样品准备：人和动物的自然凝固后血清、EDTA抗凝血浆。不建议使用肝素抗凝。新鲜血液4ºC 2000 g离心5 min得到血浆，非抗凝血4ºC放置2小时得到血清。可4ºC存放数天或−20 ºC半年。如超过线性范围用生理盐水1:1~1:5稀释后测定。
所需设备：酶标仪、生化分析仪、可见光分光光度计。最佳工作波长550-555nm，如无此波长建议优先选用570、530、490nm。比色杯光径1cm。
标准品稀释：5 mM胆固醇标准品用无水乙醇倍比稀释为2500、1250、625、312.5、156、78、36 µmol/L。通常设置稀释4个点/管即可，注意设置0浓度对照反应管。立即使用，用毕弃去。
1. LDL/VLDL -胆固醇分离步骤
1.1. 取50 μL血清或血浆(样品体积范围20-100 μL)
1.2. 加等体积50 μL的LDL/VLDL捕获剂，振荡混匀。
1.3. 室温孵育10分钟。沉淀10-30分钟、室温或4ºC不影响结果，但条件要一致。
1.4. 2000 g离心20分钟。离心温度4～22度均可，不同样品离心条件要一致。
1.5. 沉淀含有LDL/VLDL-胆固醇。小心吸除上清，再次2000 g 离心 10 分钟，弃尽上清。
1.6. 加入 100 μL PBS 或生理盐水（初始血浆样品的
2 倍体积），振荡重悬沉淀。。
2. LDL/VLDL-胆固醇测定步骤：
2.1. 配制测定工作液: 按4:1比例，取4 ml试剂R1与1 ml试剂R2混合，立即使用。4ºC保存<1天，变色弃去。
2.2. 取190 µl测定工作溶液，加入微板孔内。
2.3. 加入步骤1.6制备的上清液10μL。上清液体含HDL-胆固醇，放置后如有絮状物应再次离心。标准品管的加样量也是10 µl标准品。反应总体积200 µl。
2.4. 37ºC 20min (15~30min)。或25ºC室温反应30 min但灵敏度略低。反应平衡后颜色在60 min内稳定。
2.5. 先用蒸馏水空白管调零。然后测定各管OD550值。绘制标准曲线并计算总胆固醇浓度。Excel作图步骤参考：各标准管OD值为y轴，标准品浓度为x轴。(1)鼠标左键圈住数据，点击做图向导，选择-散点图-，点击-完成-。(2)鼠标右键点图上的某一点，点击-添加趋势线-，点击-选项-，点击-显示公式-和-R2值。
说明：
- 可微量调整样品与工作液体积比例。
- 正常人血中总胆固醇参考值2.86~5.98mmol/L或 110~230mg/dl。
- 维生素C>0.18g/L、血红蛋白>2g/L、胆红素>0.25g/L、强还原剂二硫苏糖醇、巯基乙醇等干扰测试。
参考文献
- Trinder, P. (1969). Annals of Clin. Biochem. 6: 24 – 27.
- Barham D and Trinder P. (1972). Analyst 97: 142 – 145
近日，北京普利莱基因技术有限公司获得“国家高新技术企业”证书，高新技术企业的认定，是对企业的核心自主知识产权、科技成果转化能力、研发实力、团队建设、成长性指标和人才结构等综合能力的全方位考评。
此项认定不仅是科研企业在业内的最高荣誉之一，也是目前国内对企业在科技综合实力方面最权威的评价。这一殊荣的获得，是国家对普利莱在研发和技术创新能力的充分肯定和认可。
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文献和实验。如肝素锰沉淀血清中VLDL和LDL，离心沉淀，HDL则留在上清液，再定量HDL量，即为血浆HDL的量。也可采用聚乙烯硫酸盐沉淀LDL，离心去上清液留沉淀，再定量沉淀其中的LDL，即血浆的LDL量。脂蛋白是一种既有蛋白质又有胆固醇，还有磷脂的复合体，如何定量，尚无一种较为理想的方法。目前仅以测定脂蛋白中胆固醇总量的方法作为脂蛋白的定量依据，即测定HDL、LDL或VLDL中的胆固醇，并分别称为高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）或极低密度脂蛋白-胆固醇（VLDL-C
怎样发挥作用？目前检测的HDL-C能代表HDL的真正水平和功能吗？ HDL与胆固醇逆转运机制 HDL是胆固醇逆转运（RCT）的主要执行者。新生HDL呈圆盘状，主要成分为载脂蛋白A1（Apo A1）和磷脂，从外周细胞摄取胆固醇并进入血液循环，在卵磷酯胆固醇酰基转移酶（LCAT）作用下，HDL表面的胆固醇转变成胆固醇酯（CE）并移向其核心部分，表面消耗的胆固醇不断从细胞膜、乳糜微粒和极低密度脂蛋白中得到补充。HDL作为胆固醇的接受体不断移走细胞膜上的胆固醇
蛋白颗粒的亲水性，使其能均匀分散在血液中。从CM到HDL，直径越来越小，故外层所占比例增加，所以HDL含载脂蛋白，磷脂最高。 (四)载脂蛋白 脂蛋白中的蛋白质部分称载脂蛋白，主要有apoA、B、C、D、E五类。不同脂蛋白含不同的载脂蛋白。载脂蛋白是双性分子，疏水性氨基酸组成非极性面，亲水性氨基酸为极性面，以其非极性面与疏水性的脂类核心相连，使脂蛋白的结构更稳定。 (五)代谢 1?乳糜微粒 主要功能是转运外源性甘油三酯及胆固醇。空腹血中不含CM。外源
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