- ￥60
- 普利莱
- 北京
- B1218
- 2025年12月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 保质期：
1年
- 英文名：
//
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大量
- 供应商：
普利莱
- CAS号：
//
- 规格：
1L
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文献和实验大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
材料 质粒pTrc-99B 大肠杆菌LeuRS 实验步骤 1. 突变体大肠杆菌LeuRS基因的构建 以构建的编码大肠杆菌LeuRS的基因leuS作为模板，利用两步PCR反应扩增得到六个LeuRS变种酶的基因序列(图1)。 第一轮PCR反应的5’和3’引物：引物1和引物4分别具有NcoI和HindIII酶切位点，构建各突变所用的引物如表1所示。PCR反应产物经用NcoI和HindIII
] 。在上述基础上，我们进一步优化了分离方法，并将其用于本实验室大规模的叶绿体分离和蛋白质组分析工作中 [16] 。这种方法没有进行过叶绿体蛋白质输入活性的测试，但是本方法具有产率高，污染低的优点，尤其适合于叶绿体的蛋白质组分析。关于用于体外蛋白质输入活性试验的叶绿体分离方法，可以参考其他的一些报道 [17] 。2. 材料 ( 1 ) 介质 A ( 匀浆缓冲液，见注释 1)：50 mmol/L HEPES-KOH ( pH 8.0) 、330 mmol/L 山梨醇、2 mmol/L EDTA
操作方法如下： 血管： 取 0.1 克新鲜血管，用剪刀剪成若干小块，然后放入 2 毫升离心管中，加入 1 颗 6 mm 研磨钢珠，盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻 1 分钟左右或直到液氮不沸腾，然后放入机器处理 30 秒钟。取出样品管可见样品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取缓冲液，可以进行接下来的后续提取，加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃ 以下。 叶片： 取 0.2 克植物叶片，清洁叶片表面后放入离心管中，加入
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