PRIME-XV 树突细胞化学成分限定培养基

PRIME-XV 树突细胞化学成分限定培养基是一种化学成分确定的、无动物成分的培养基，开发用于将单核细胞体外分化为未成熟树突细胞 (iDC) 并随后成熟以产生成熟树突细胞 (mDC)。不含动物或人类来源的原材料中发现的影响功能能力的不确定成分。PRIME-XV 树突细胞化学成分限定培养基支持具有诱导 T 细胞反应功能力的 mDC 的有效成熟。

配方可产生高产量的功能性细胞

• 实现具有所需特性和功能的 DC 的高产量
• 维持树突状细胞刺激 T 细胞的效力
• 即用型，只需补充所需的细胞因子

设计和制造以促进从研究到临床的过渡

• 不含任何动物或人体成分
• 符合cGMP法规制造
• 强大的原材料控制和供应链管理
• 提供的可追溯性文件包括分析证书、原产地证书和向美国 FDA 备案的药物主文件 (DMF)*

*DMF备案中



高产活细胞且具有所需特性

图1.在化学成分明确的培养条件下获得活细胞高产量。在存在GM-CSF和IL-4的条件下，来自5个不同供体的富集CD14+单核细胞在PRIME-XV DENDRITIC CELL MATURATION CDM、其他市售培养基或RMPI+10%FBS中培养6天，以诱导分化，然后在TNF-α、IL-1β、IL-6和PGE₂中再培养2天，以诱导成熟，在各相应培养基中联合培养持续8天。通过流式细胞术分析所得细胞，以测定活细胞密度。产量表示为总活细胞占第0天铺板的初始CD14+单核细胞的百分比。


图2.在PRIME-XV DENDRITIC CELL MATURATION CDM中成熟的树突状细胞表现出所需的表型和形态。
在存在GM-CSF和IL-4的条件下，阴性富集的CD14+单核细胞在PRIME-XV DENDRITIC CELL MATURATION CDM中培养天，以诱导分化，随后在TNF-α、IL-1β、IL-6和PGE₂中再培养2天，诱导成熟，联合培养持续8天。用小鼠抗人CD80（Biolegend，目录号305211）、HLA-DR（Biolegend，目录号307611）和Hoechst 33342（ThermoFisher，目录号62249）标记细胞。在x放大倍数下拍摄免疫荧光图像。

在整个成熟过程中维持适当的标记物表达


图3.通过表面标记表达谱证明其功能性。
阴性选择的CD14+单核细胞在PRIME-XVDENDRITIC CELL MATURATION CDM中培养6天，加入GM-CSF和IL-4诱导分化，随后在Jonuleit混合物（TNF-α、IL-1β、IL-6和PGE₂）或Kalinsky混合物（TNF-α、IL-β、IFN-γ、IFN-α和Poly（I:C））中再培养天，以诱导成熟，联合培养持续8天。收获细胞，并用流式细胞仪分析表面标记物表达。在第0天（单核细胞）、第6天（未成熟DC）和第8天（成熟DC）分析用Jonuleit混合物培养的细胞，显示了整个DC成熟过程中的典型表面标志物表达谱（A）。在第8天分析Jonuleit混合物培养物和Kalinsky混合物培养物，并在各混合物方法学中显示了典型表面标记物表达谱的成熟特征（B）。

保持对T细胞刺激的效力

图4.PRIME-XV DENDRITIC CELL MATURATION CDM产生能够诱导T细胞增殖的DC。
第8天收获在PRIME-XV DENDRITIC CELL MATURATION CDM中培养的Mo-DC，与同种异体CD4+T细胞以1:20（DC与T）的比例在添加IL-2的T细胞扩增培养基中共培养6天。通过CFSE缺失证实T细胞刺激能力（n=3）。CD4+T细胞在无Mo-DC培养的单独IL-2中或添加抗CD3/抗CD28的IL-2中培养，分别作为阴性和阳性对照。
图5.PRIME-XV DENDRITIC CELL MATURATION CDM产生能够诱导T细胞极化的DC。
第8天收获在PRIME-XV DENDRITIC CELL MATURATION CDM中培养的Mo-DC，与同种异体CD4+T细胞以1:10（DC与T）的比例在添加IL-2的T细胞扩增培养基中共培养6天。第6天进行的流式细胞术显示共培养细胞中的IFN-γ表达增加。


规格
贮存：本产品以 2-8°C 冷藏包装运输。 收到后，立即储存在 2-8°C 并避光。
保质期：使用无菌技术处理以避免污染。 未开封的液体培养基自生产之日起 18 个月内稳定，如标签所示，在 2-8°C 下避光保存。