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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
Antibiotic Solution 2(100X)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
4×1.5ml
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:支原体去除试剂2(100X)哪家好
英文名称:Antibiotic Solution 2(100X)
产品规格:4×1.5ml
发货周期:1~3天
在细胞培养过程中,定期检测能够有效的避免支原体大量污染,但如果细胞已受支原体污染,则需对其进行及时处理,最佳处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃,以免污染其它洁净的细胞株。若受污染的细胞比较珍贵,必须去除支原体污染,可以通过混合使用抗生素以达到目的。由于支原体无细胞壁,因此传统的抗生素一般对其无效。本品是一种基于四环素衍生物的抗生素,与另外一种基于截短侧耳素类衍生物的抗生素1(SY0543)按先后顺序联合使用,可取得良好的支原体清除效果。
使用方法
注本品必须与SY0543联合使用才可以达到最佳的支原体清除效果。
1)使用前确保瓶盖密封,解冻至室温,轻轻漩涡混匀并用70%乙醇擦拭瓶子表面,再放到超净工作台上。
2)按先后顺序联合使用SY0543和SY0544处理细胞
a.受污染的细胞分盘后,每10ml培养基中加入100µlSY0543溶液培养4天,期间需换液时按同等比例加入SY0543溶液。
b.4天后换液,每10ml培养基中加入100µlSY0544溶液培养3天,期间需换液时按同等比例加入SY0544溶液。
3)以上述a,b处理为一个循环,根据实际情况此循环重复2-3次。
4)处理过程中推荐使用PCR支原体检测试剂盒(SY0542)检测支原体去除效果。
储存条件-20℃避光,有效期18个月
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人脱/脱啉DPD定量检测试剂盒 免疫测定
人Ⅰ型前胶原C末端肽CⅠCP定量检测试剂盒 免疫测定
人骨胶原交联Cr定量检测试剂盒 免疫测定
人脂蛋白αLpα定量检测试剂盒 免疫测定
人糖原酶同工酶BBGPBB定量检测试剂盒 免疫测定
人糖原酶同工酶MMGPMM定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠胰岛素(Insulin)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒ELISA Kit Rat Insulin ELISA Kit
大鼠C肽(CPeptide)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat CPeptide ELISA Kit
大鼠促肾上腺激素皮质激素(Rat ATH)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat ATH ELISA Kit
大鼠绒促性腺激素(HCG)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat HCG ELISA Kit
大鼠促黄体激素(LH)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat LH ELISA Kit
大鼠促卵泡生长激素(Rat FSH)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat FSH ELISA Kit
大鼠促素(Prolactin)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Prolactin ELISA Kit
支原体去除试剂2(100X)哪家好 1号染色体开放阅读框201抗体 AP13 ELISA Kit apelin 13(AP13)ELISA试剂盒
格列 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
卷曲螺旋结构域蛋白7抗体 AP12 ELISA Kit apelin 12(AP12)ELISA试剂盒
突厥 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
CD163蛋白样1抗体 Alpha-D TPL ELISA Kit Alpha-D 生育/维生素E(Alpha-D TPL)ELISA试剂盒
1-羟-2,3,4,7-四山山 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;10mg
卷曲螺旋结构域蛋白80抗体 PP1030 ELISA Kit AP-5复合物β亚(PP1030)ELISA试剂盒
水甘草 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
周期素依赖性激酶5调节蛋白1样蛋白1抗体 AGRP ELISA Kit Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒
地黄素 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
22号染色体开放阅读框31抗体 AFG3L2 ELISA Kit AFG3样蛋白2(AFG3L2)ELISA试剂盒
雷帕 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
细胞分裂周期37样蛋白1抗体 ENHO ELISA Kit Adropin(ENHO)ELISA试剂盒
2-金刚醇 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
羧肽酶X抗体 ARF5 ELISA Kit ADP-核糖化子5(ARF5)ELISA试剂盒
伏格列波糖 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
操作步骤(仅供参考):
1、支原体去除试剂2(100X)哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验s变性、55℃/1min退火、72℃/1min延伸,循环30次后72℃延伸5min。第1次PCR反应取模板10μL,第2次PCR反应以第1次PCR扩增产物为模板取1μL。 一种名为BM-Cyclin的化学试剂,除体外培养癌细胞中支原体污染具体方法: 1、选用抗支原体药物(BM-Cyclin-1、2 ),磷酸缓冲液配制,溶液抽滤除菌,0~4℃保存。 2、细胞处理过程:细胞传代同时加BM-Cyclin-1 10μg/ml,37℃培养3天;胰蛋白酶消化、传代,加入BM-Cyclin-2 5μg
温度和时间为:94℃/2min预变性、94℃/30s变性、55℃/1min退火、72℃/1min延伸,循环30次后72℃延伸5min。第1次PCR反应取模板10μL,第2次PCR反应以第1次PCR扩增产物为模板取1μL。 丁香园网友我是小米的问题: 不知支原体污染后,有什么比较好的办法?能不能谈的比较详细一些,如具体的抗生素浓度。 丁香园网友zllxash的回答: 一种名为BM-Cyclin的化学试剂,除体外培养癌细胞中支原体污染具体方法: 1、选用抗支原体药物(BM-Cyclin
扩增产物为模板取1μL。一种名为BM-Cyclin的化学试剂,除体外培养癌细胞中支原体污染具体方法:1、选用抗支原体药物(BM-Cyclin-1、2 ),磷酸缓冲液配制,溶液抽滤除菌,0~4℃保存。2、细胞处理过程:细胞传代同时加BM-Cyclin-1 10μg/ml,37℃培养3天;胰蛋白酶消化、传代,加入BM-Cyclin-2 5μg/ml,37℃培养3天;继续传代追加BM-Cyclin-2 5μg/ml一次,培养2~4天(如细胞污染严重可重复上述处理过程)弃药液,D-Hank’s液洗2次,胰蛋白
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