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- 上海一研
- EY-Z7308
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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
详见说明书
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 库存：
22
- 英文名：
小鼠树突状细胞
- 生长状态：
贴壁
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
电询
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
骨髓；树突状细胞；C57BL/6
- 规格：
详见说明书
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
以下是产品信息的认购信息：
产品名称： 小鼠树突状细胞
商品货号： EY-Z7308
中文名称： 小鼠树突状细胞
规格：T25
组织来源：骨髓；树突状细胞；C57BL/6
生长特性：贴壁生长
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件：1640+10%FBS
传代方法：1:2传代
冻存条件：无血清细胞冻存液
细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1.
细胞复苏步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养步骤：
小鼠树突状细胞对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线。
IPC-ALKS-10 1-癸烷磺酸钠[离子对色谱级] 质量规格：>98.0%(HPLC)
IPC-ALKS-11 1-十一烷基磺酸钠[离子对色谱级] 质量规格：>98.0%(HPLC)
IPC-ALKS-12 1-十二烷基磺酸钠[离子对色谱级] 质量规格：>98.0%(HPLC)
IPC-ALKS-13 1-十三烷磺酸钠[离子对色谱级] 质量规格：>98.0%(HPLC)
IPC-SDS 十二烷基硫酸钠[离子对色谱级] 质量规格：>98.0%(HPLC)
IPC-PFFA-8(ca.5mmol) 十五氟辛酸(约5mmol)[离子对色谱级] 质量规格：>98.0%(HPLC)
IPC-PFFA-8HG 十五氟辛酸,高等级[离子对色谱级] 质量规格：>98.0%(HPLC)
IPA-DAS 9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸钠盐[离子对色谱级] 质量规格：>98.0%(HPLC)
Diuron 敌草隆(标准品) 质量规格：>98.0%(HPLC)
Alizarinred 茜素红 质量规格：>98.0%(HPLC)
AlizarinyellowGG 茜素黄GG 质量规格：>98.0%(HPLC)
AlizarinyellowR 茜素黄R 质量规格：>98.0%(HPLC)
Aluminon 铝试剂,玫红三羧酸铵 质量规格：>98.0%(HPLC)
Aluminon 铝试剂 质量规格：>98.0%(HPLC)
AcidchromeblueK 酸性铬蓝K 质量规格：>98.0%(HPLC)
小鼠树突状细胞Aromatase 芳香化酶抗体规格 0.1ml
Aromatase 芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体规格 0.1ml
ARNT2 芳香烃受体核转录蛋白2抗体规格 0.2ml
ARMER ARMER抗体规格 0.2ml
ARMCX3 ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体规格 0.2ml
ARMCX2 ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体规格 0.2ml
ARMCX1 ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体规格 0.2ml
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文献和实验一、方法 根据1999年lutz的方法，做了一些改进，培养DC很多人用的是高浓度的细胞，高浓度的因子，但是这样产量不高，我每一次分离一只小鼠的骨髓，大约可以得到107个细胞，分成10盘，每盘10 ml培养基，用低浓度的细胞因子，这样可以大大提高产量，每次能培养得到1*107个DC左右，流式细胞术检测：细胞纯度应该大于90%，这个方法还是很好用的。 二、具体步骤 1. C57Bl/6小鼠 2. 处死小鼠，75%酒精浸泡10 min。 3. 解剖取出小鼠
养BMDC有好几个月了，看了2、3篇文献就开搞，发现论坛里还是有一些战友养这个。就想开个专题讨论贴，请新手老手都上来谈谈经验或者问些问题。集思广益，大家相互促进下。 我在论坛里看到因为有战友养DC看百把篇文献的，感到佩服又奇怪，就BMDC的培养我目前只知道有个经典版本和改良版本。 我用的是改良版本，参考文献改天附上（可能养这个的战友大多看过了）。 1. 取小鼠股骨胫骨，小鼠要年轻！（6W-8W，以前用只一年左右的养出来外形也张牙舞爪，但流式检测没有CD11c表达，很奇怪
能力较强，通常经巨噬细胞递呈的抗原多肽过短，导致巨噬细胞的抗原递呈能力有限。而树突状细胞具有适中的抗原消化能力，其表面高表达 MHC II（人HLA-DR：Cat#E-AB-F1111；小鼠 I-A/I-E：Cat#E-AB-F0990）以及丰富的共激信号分子（Co-stimulatory Molecules）。在捕获外来抗原的后，树突状细胞能将其水解为合适长度的多肽片段，并通过表面丰富的MHC II 递呈给辅助性 T 细胞，通过共激分子强烈激活 T 细胞，使其增殖、活化并分泌大量免疫效应
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