YT?免疫荧光染色二抗稀释液说明书

中文名称：YT?免疫荧光染色二抗稀释液说明书
英文名称：YT? Secondary Antibody Dilution Buffer for Immunofluorescence
产品规格：100ml
发货周期：1～3天
本品是最新一代的快速高效封闭液，总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、血清等的二抗稀释液，可以用于免疫荧光(Immunofluorescence，IF)检测时二抗的稀释和配制。
YT™免疫荧光染色二抗稀释液可以有效节约二抗。经本产品稀释的二抗可以在2-3周内重复使用3-5次。
YT™免疫荧光染色二抗稀释液稀释的二抗孵育后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白，确保极高的信噪比。
YT™免疫荧光染色二抗稀释液兼容性好，兼容各种荧光标记的二抗。同时本产品不含生物素，也不会干扰基于生物素的荧光检测。
YT™免疫荧光染色二抗稀释液使用便捷。本产品无需添加任何额外的试剂，可以直接用于二抗的稀释。
注意事项
1.为进一步提高信噪比，推荐同时使用YT™免疫染色封闭液(YT886)和YT™免疫染色一抗稀释液(YT887)用于封闭及一抗的稀释。
2.为了能使稀释的二抗可以反复多次使用，二抗孵育结束后稀释的二抗应立即存放在4℃，以便于后续重复使用。
储存条件4℃，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．YT?免疫荧光染色二抗稀释液说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
以下是公司正在热销产品：
　含量：≥98%　规格：10mg/支
Pentobarbital Sodium　含量：≥98%　规格：5mg/支
胃蛋白酶 1:10000　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
Pepsin 1:10000, Porcine Source　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
胃蛋白酶 1:3000　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
Pepsin 1:3000, Porcine Source　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
胃蛋白酶抑制剂　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
Pepstatin　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
槲皮素　含量：　规格：2 mg/支
Quercetin　含量：　规格：5mg/支
蜜三糖五水　含量：　规格：5mg/支
Raffinose, pentahydrate　含量：　规格：5mg/支
核黄素 (400B2)　含量：　规格：5mg/支
Riboflavin　含量：　规格：5mg/支
核糖核酶A　含量：　规格：5mg/支
Ribonuclease A, Bovine Pancreas　含量：　规格：5mg/支
YT?免疫荧光染色二抗稀释液说明书Ceforanide48T/96T进口、国产1620CefadroxilHPLC≥98%
CefotaximeSodium48T/96T进口、国产1620CefamandoleLithiumHPLC≥98%
Cefotetan48T/96T进口、国产1620CefamandoleNafateHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
CefotiamHydrochloride48T/96T进口、国产1620CefditorenPivoxilHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620CefazolinHPLC≥98%
CefpodoximeProxetil48T/96T进口、国产1620CefdinirHPLC≥98%
注意事项：
      尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。