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- 2026年09月30日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
详见说明书
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 库存：
27
- 英文名：
小鼠海马神经元细胞系
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
电询
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 免疫类型：
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- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 规格：
详见说明书
以下是产品信息的认购信息：
产品名称： 小鼠海马神经元细胞系培养
商品货号： EY-Z6985
中文名称： 小鼠海马神经元细胞系
规格：T25
生长特性：贴壁生长
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件：1640+10%FBS
传代方法：1:2传代
冻存条件：无血清细胞冻存液
细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1.
细胞复苏步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养步骤：
小鼠海马神经元细胞系培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
β-胡萝卜素β-Carotene (≥98%,HPLC)7235-40-720MG标准品
百秋李醇Patchouli alcohol (≥98%,HPLC)5986-55-020MG标准品
去氢木香内酯Dehydrocostus Lactone (≥98%,HPLC)477-43-020MG标准品
木香烃内酯Costundide (≥98%,HPLC)553-21-920MG标准品
补骨脂素Psoralen (≥98%,HPLC)66-97-720MG标准品
异补骨脂素Angelicin (≥98%,HPLC)523-50-220MG标准品
肉桂醇Cinnamyl alcohol (≥98%,HPLC)104-54-120MG标准品
果糖Fructose (≥98%,HPLC)7660-25-520MG标准品
芒果苷Mangiferin (≥98%,HPLC)4773-96-020MG标准品
新芒果苷Neomangiferin (≥98%,HPLC)64809-67-220MG标准品
DL-薄荷醇DL-Menthol (≥98%,HPLC)89-78-120MG标准品
酪醇Tyrosol (≥98%,HPLC)501-94-020MG标准品
马钱苷Loganin (≥98%,HPLC)18524-94-220MG标准品
钩藤碱Rhyncholphylline (≥98%,HPLC)76-66-420MG标准品
灰毡毛忍冬皂苷;Macranthoid 订购|咨询 Human anti-cartilage-antibody ELISA Kit 人抗软骨 规格： 20mg
黄杨碱;Cyclovirobuxine 订购|咨询 SOD(Mouse Super Oxidase Dimutase)ELISA Kit 小鼠超氧物歧酶 规格： 20mg
瓜子金皂苷己;Polygalasapon 订购|咨询 S-100 ELISA Kit 大鼠S100蛋白 规格： 20mg
覆盆子;4-(4-Hydroxyphe 订购|咨询 S-100B ELISA Kit 大鼠S100B蛋白 规格： 20mg
3,5-O-二酰基奎宁;3,5-D 订购|咨询 AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗人绒毛膜促性腺激素 规格： 20mg
大酰 ;Cannabisin A 订购|咨询 C-Peptide(Mouse C-Peptide)ELISA Kit 小鼠C肽 规格： 20mg
大车前苷;plantamajoside 订购|咨询 IL-1 ELISA Kit 大鼠白介素1 规格： 20mg
川翠定;Bonvalotidine A 订购|咨询 HSP gp96(Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96)ELISA Kit 小鼠热休克蛋白糖蛋白96 规格： 20mg
穿心莲内酯;Andrographolid 订购|咨询 AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗染色体 规格： 20mg
巴苏木素;Brazilin 订购|咨询 CH50(Mouse 50% complement hemolysis)ELISA Kit 小鼠血清总补体 规格： 20mg
;Benzoic acid 订购|咨询 ABAb(Human anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 人抗脑组织 规格： 50mg
四环素;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1β 规格： 0.25g
菌丹;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 AGA(Human anti-gliadin antibody) ELISA Kit 人抗麦胶蛋白/麦溶蛋白 规格： 0.25g
草津;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 B7-2/sCD86(Mouse soluble Cluster of differentiation 86)ELISA Kit 小鼠可溶性CD86 规格： 0.1g
异草;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 MYO/MB ELISA Kit 大鼠肌红蛋白 规格： 0.1g
双;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 INS(Mouse Insulin)ELISA Kit 小鼠胰岛素 规格： 0.1g
氧;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 APSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit 人抗磷脂酰丝 规格： 0.1g
双脒;纯品型;标准品;;有证书 订购|咨询 TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2 规格： 0.1g
小鼠海马神经元细胞系培养FAM36A FAM36A蛋白抗体规格 0.2ml
FAM29A/HAUS6 FAM29蛋白抗体规格 0.2ml
FAM21C FAM21C蛋白抗体规格 0.2ml
FAM168A/TCRP1 舌癌化疗耐药相关蛋白1规格 0.2ml
FAM166A FAM166A蛋白抗体规格 0.2ml
FAM164B FAM164B蛋白抗体规格 0.2ml
FAM161B FAM161B蛋白抗体规格 0.2ml
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线。
产品名称： 小鼠海马神经元细胞系培养
商品货号： EY-Z6985
中文名称： 小鼠海马神经元细胞系
规格：T25
生长特性：贴壁生长
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件：1640+10%FBS
传代方法：1:2传代
冻存条件：无血清细胞冻存液
细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1.
细胞复苏步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养步骤：
小鼠海马神经元细胞系培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
β-胡萝卜素β-Carotene (≥98%,HPLC)7235-40-720MG标准品
百秋李醇Patchouli alcohol (≥98%,HPLC)5986-55-020MG标准品
去氢木香内酯Dehydrocostus Lactone (≥98%,HPLC)477-43-020MG标准品
木香烃内酯Costundide (≥98%,HPLC)553-21-920MG标准品
补骨脂素Psoralen (≥98%,HPLC)66-97-720MG标准品
异补骨脂素Angelicin (≥98%,HPLC)523-50-220MG标准品
肉桂醇Cinnamyl alcohol (≥98%,HPLC)104-54-120MG标准品
果糖Fructose (≥98%,HPLC)7660-25-520MG标准品
芒果苷Mangiferin (≥98%,HPLC)4773-96-020MG标准品
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DL-薄荷醇DL-Menthol (≥98%,HPLC)89-78-120MG标准品
酪醇Tyrosol (≥98%,HPLC)501-94-020MG标准品
马钱苷Loganin (≥98%,HPLC)18524-94-220MG标准品
钩藤碱Rhyncholphylline (≥98%,HPLC)76-66-420MG标准品
灰毡毛忍冬皂苷;Macranthoid 订购|咨询 Human anti-cartilage-antibody ELISA Kit 人抗软骨 规格： 20mg
黄杨碱;Cyclovirobuxine 订购|咨询 SOD(Mouse Super Oxidase Dimutase)ELISA Kit 小鼠超氧物歧酶 规格： 20mg
瓜子金皂苷己;Polygalasapon 订购|咨询 S-100 ELISA Kit 大鼠S100蛋白 规格： 20mg
覆盆子;4-(4-Hydroxyphe 订购|咨询 S-100B ELISA Kit 大鼠S100B蛋白 规格： 20mg
3,5-O-二酰基奎宁;3,5-D 订购|咨询 AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗人绒毛膜促性腺激素 规格： 20mg
大酰 ;Cannabisin A 订购|咨询 C-Peptide(Mouse C-Peptide)ELISA Kit 小鼠C肽 规格： 20mg
大车前苷;plantamajoside 订购|咨询 IL-1 ELISA Kit 大鼠白介素1 规格： 20mg
川翠定;Bonvalotidine A 订购|咨询 HSP gp96(Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96)ELISA Kit 小鼠热休克蛋白糖蛋白96 规格： 20mg
穿心莲内酯;Andrographolid 订购|咨询 AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗染色体 规格： 20mg
巴苏木素;Brazilin 订购|咨询 CH50(Mouse 50% complement hemolysis)ELISA Kit 小鼠血清总补体 规格： 20mg
;Benzoic acid 订购|咨询 ABAb(Human anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 人抗脑组织 规格： 50mg
四环素;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1β 规格： 0.25g
菌丹;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 AGA(Human anti-gliadin antibody) ELISA Kit 人抗麦胶蛋白/麦溶蛋白 规格： 0.25g
草津;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 B7-2/sCD86(Mouse soluble Cluster of differentiation 86)ELISA Kit 小鼠可溶性CD86 规格： 0.1g
异草;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 MYO/MB ELISA Kit 大鼠肌红蛋白 规格： 0.1g
双;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 INS(Mouse Insulin)ELISA Kit 小鼠胰岛素 规格： 0.1g
氧;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 APSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit 人抗磷脂酰丝 规格： 0.1g
双脒;纯品型;标准品;;有证书 订购|咨询 TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2 规格： 0.1g
小鼠海马神经元细胞系培养FAM36A FAM36A蛋白抗体规格 0.2ml
FAM29A/HAUS6 FAM29蛋白抗体规格 0.2ml
FAM21C FAM21C蛋白抗体规格 0.2ml
FAM168A/TCRP1 舌癌化疗耐药相关蛋白1规格 0.2ml
FAM166A FAM166A蛋白抗体规格 0.2ml
FAM164B FAM164B蛋白抗体规格 0.2ml
FAM161B FAM161B蛋白抗体规格 0.2ml
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线。
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文献和实验相关实验
Hippocampal Neuron Cultures (and mixed cortical cultures) Submitted by: Jean Siao, Ph.D. Begin by timing the pregnant mouse at E17-E19 days of gestation. Have ready the following: 1. Cold Hank’s balanced salt solution 2. 1x trypsin
序言：国内外关于原代培养有很多文献，不幸的是，没有一篇是详细的，没有一篇解答过why。 为了让大家少走弯路，根据我杀过3000只老鼠的经验，我把我这几年摸索的经验和大家分享，相信你follow我的这篇文章一定会做的很好。 我的标题说的很像吹牛，但是我是严肃认真的说的，I earn it。 note:这篇文章全是我个人的经验，99.9%原创，经过无数失败的到的最完美的原代神经元培养法。 1. 材料选择 一定要严格按照国际上，NCBI数据库，其他文献
Protocol for the Primary Culture of Cortical and Hippocampal neurons Solutions and media required:Poly D-lysine/laminin solution - pdfDM/KY - pdfOptimem - pdfNeuronal growth medium - pdfSet-up for the dissection:Day 1:Add poly D-lysine/laminin
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