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- 文献和实验
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- 库存:
46
- 英文名:
Escherichia│coli
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
一,菌种的概念 原意是指孢子(相当于植物的种子) ,但在实际生产中,常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。
二,菌种的类型 在生产中根据菌种的来源,繁殖代数及生产目的,把菌种分为母种,原种和栽培种.分别叫一级种,二级种,三级种。
母种:将纯菌丝体或孢子在试管培养基中繁殖而成.可以繁殖原种,也适宜菌种保藏.
原种:母种菌丝在固体培养基上繁殖而成.这一过程增强菌丝对培养环境的适应性,又起到扩繁的作用.原种可以直接出菇。
中文名称 大肠埃希氏菌DH5α/pET28a-akt1培养
种属 Escherichia│coli
提供形式 斜面培养物
安全等级 1
模式菌株 no
应用领域 保存akt1基因,用于akt1蛋白表达
培养方法
培养基 LB+kanamycin+chloramphenicol (25微克每毫升)
生长条件 37C
存储条件 -80℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
保藏方法:
1. 传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。
2. 液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3. 载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5. 冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
公司专业代理ATCC菌种,大肠埃希氏菌DH5α/pET28a-akt1培养价格优惠,质量保证,为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
LTRYPTOPHANL色酸美国药典级500G223RT
0N,英文名或英文缩写:Benzopxenone,级别:AR,98%,规格:25克
碳酸钡shēng huà shì jì容量:25克
RNASIN RNA酶 INHIBITOR(20℃)NA
胆酯酶(猪胰)100克
2酰基2甲... 2Acrylamido2methyl1propanesulfoni... 898 100G 通用试剂
无水化 litxium bromidq 20328
CIN培养基250g用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的分离培养
改良BPLS琼脂 BPLS Agar,Modified 用于各种标本中沙门氏菌选择性分离培养(ISO标准)
3号胆盐 Bile salt No. 3 25克 BR,90%
碎肉肉汤基础250g/瓶用于厌氧菌特别是专性厌氧菌的培养、增菌和修复,含维生素K,需添加(庖肉牛肉粒)incubationmedia碎肉肉汤基础250g/瓶用于厌氧菌特别是专性厌氧菌的培养、增菌和修复,含维生素K,需添加(庖肉牛肉粒)
A-1培养基 250g 用于水中粪大肠菌群检测
大肠埃希氏菌DH5α/pET28a-akt1培养n-Butyl-β-D-fructopyranoside 67884-27-9 中文名: 分子式:C10H20O6 Human plasminogen activator (PLGA) ELISA Kit 人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒
3'-Hydroxygynuramide II 1401093-57-9 中文名: 分子式:C42H83NO6 Humanai-IgEreceptoraibodyELISAKit 人抗IgE受体抗体ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Senkyunolide S 172723-28-3 中文名: 分子式:C12H16O5 Humandenguefeveraibody,DFELISA试剂盒人登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Senkyunolide R 172549-37-0 中文名: 分子式:C12H16O5 组织JNK3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Senkyunolide E 94530-83-3 中文名: 分子式:C12H12O3 Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
操作流程:
菌株复苏:(按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏)
1) 所有菌株,显色培养基分4区,每区一株,标明菌株号、菌种名常用缩写如下:
cal: 白念珠菌 cgl:光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌,其他菌种标记全名。
2) 隐球菌除传显色培养基以外,另传1/2块血平皿上述菌株统一37oC孵育48h
菌种鉴定:(48h后观察结果)。
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文献和实验提取阳性克隆酵母菌的质粒,转化至大肠杆菌E.coli DH5α中,因pGADT7质粒含Amp+ 抗性基因,在Amp+抗性平板上筛选阳性克隆AD- X(X代表阳性克隆中携带的龙须菜cDNA,即为初步筛选得到的相互作用蛋白质的cDNA)。 7.阳性克隆的再验证 pGBKT7 –CaM 与AD–X质粒共转化酵母菌Y2HGold,重新验证相互作用消除假阳性。按表1组合,转化后的酵母菌涂布于SD–Trp/-Leu/-His/-Ade/Aba/X-α-gal平板上,30 ℃培养
,但若明确其中主要试剂的作用,所提取的质粒DNA 的纯度及质量会更高。笔者通过不同的试剂进行摸索,现将结果报告如下。1 材料和方法1. 1 材料1. 1. 1 实验菌株 使用菌株为大肠杆菌DH5α,菌株内含质粒pB I121,该质粒上克隆一h IL212基因。1. 1. 2 主要试剂 氨苄青霉素、RNaseA购自华美生物工程公司; DL15000、DL2000核酸分子量标记购自TAKARA公司;其它各种常规化学试剂均为分析纯。1. 2 方法1. 2. 1 质粒DNA的提取[ 1 ] 采用4种不同
效率比双交换效率高,且易得到多拷贝整合,其发生机制可能是重复单交换引起的。携带外源基因的表达载体可通过电穿孔、原生质体生成法或全细胞法转化酵母细胞。甲醇酵母转化和大肠埃希氏菌转化不同之处是前者较为复杂。对于大肠埃希氏菌而言,只要把重组表达载体导入细胞体内即可。因其载体上携带有自身复制原点,可随染色体复制而复制,重组表达载体能够稳定存在。在甲醇酵母系统中,所有的表达载体均不含酵母复制原点。这就是说,导入酵母体内的重组表达载体只有和酵母染色体上的同源区发生重组,整合到染色体上,外源基因才能够稳定存在,外源
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