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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
Paraformaldehyde,4%
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml/500ml
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
| 产品名称 | 4%组织细胞固定液 |
| 英文名称 | Paraformaldehyde,4% |
| 规格 | 100ml/500ml |
储存条件 -20℃,有效期1年
单位 瓶
产品说明:
(Paraformaldehyde)是免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学(ICC)研究中最常用的固定剂之一。该固定剂较为温和,能很好地保存组织的抗原性和细微结构,适于组织标本和细胞片的较长期保存,非常适合组织和细胞的光镜免疫化学研究。
本产品为4%的PBS溶液,可直接用于组织和细胞固定。若需使用其他低浓度,可使用0.01M PBS按比例稀释。
使用说明:
组织固定:室温或4℃浸泡固定2-24h,用缓冲液漂洗后即可树脂包埋用于组织切片。
切片固定:室温或4℃固定10min-2h,视切片厚度而定,用缓冲液漂洗后即可用于染色。
细胞固定:室温或4℃固定10-30min,用缓冲液漂洗后即可用于染色。
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品不含防腐剂,不宜室温或4℃长期保存,请勿反复冻融。
以下是4%组织细胞固定液的相关产品:
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Tie2 / CD202b / TEK 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD86 / B7-2 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
Tie2 / CD202b / TEK 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
CEACAM6 / CD66c 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM 25 Test
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S100A9 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
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LAMP-1 / CD107a / LAMP1 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
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4%组织细胞固定液CEACAM6 / CD66c 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
CD20 / MS4A1 抗體 (APC), 兔單抗 FCM 25 Test
实验操作步骤:
是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
蛋白质与免疫功能:
蛋白质是机体免疫防御功能的物质基础,当蛋白质营养不良时,其有关组织器官的结构和功能均受到不同程度的影响。
(一)免疫器官
蛋白质热能营养不良明显影响胸腺及外周淋巴器官的正常结构。且这种损伤是不可逆的,一旦受损其结构和功能恢复极为缓慢。
(二)细胞免疫
蛋白质营养不良时主要影响T淋巴细胞的数量和功能,医学教|育网搜集整理外周血中T淋巴细胞总数显著减少,对抗原诱导的增殖反应降低。
(三)体液免疫
蛋白质营养不良时,上皮及粘膜组织分泌液中SIgA显著减少,溶菌酶水平下降,使其组织抵抗力降低,甚至可导致感染扩散。
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文献和实验或终止内源性或外源性细胞内分解酶的反应,防止组织细胞自溶,更是为了保存组织或细胞内的抗原性,使抗原不失活,不发生弥散。不同的抗原对固定液耐受程度不同,因而要选择合适的固定剂。 现在常用的固定剂有中性甲醛液,4% 多聚甲醛-磷酸盐缓冲液。有些固定剂对特殊组织有更好效果,如苦味酸对于头皮、指甲固定有软化效果,Helly 固定液对于胰岛和垂体效果较好,PLP 固定液对于含糖组织抗原保存更好。 脱水、石蜡包埋和制片 脱水用梯度乙醇(由低到高)充分脱水,对于一些易脆的组织(如肝、脾等)应减少高浓度酒精里
FITC 标记凝集素的组织化学染色程序1.组织切片经脱蜡处理,若是Bouin液固定的组织,用70%乙醇洗3次除去组织切片内的黄色后,再用蒸馏水漂洗;2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分钟;3.加入FITC-凝集素(PBS适当稀释),置湿盒内孵育,室温1小时;4.PBS漂洗3次,每次5分钟;5.水溶性封片剂封片,荧光显微镜观察。6.结果 FITC标记的凝集素能直接与组织细胞内的糖基结合,从而显示糖基的位置,可用于检测组织细胞中的糖成分,阳性部位呈黄绿色荧光。7.注意
95%乙醇脱水性强,易引起组织收缩、变硬,影响切片质量,因而固定时间不宜过长(2小时内)。乙醇使蛋白变性程度轻,固定后蛋白可再溶解,在染色中孵育时间长的情况下,抗原可流失,并减弱反应强度。 5.乙醚(或三氯甲烷) 与乙醇等量混合对组织穿透性极强,即使涂片上含较多的黏液,固定效果仍较好,是理想的细胞固定液。 培养细胞固定之后晾干可使细胞牢固地黏附在载玻片上,故对于容易脱落的细胞应延长晾干时间。晾干之后PBS漂洗3次,然后进行组织化学或免疫组织化学染色。 用于免疫
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