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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
34
- 英文名:
Penicillin-Streptomycin-GentamicinSolution,100×
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称 青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗)哪里有买
规格: 100ml
别名 三抗
英文名称 Penicillin-Streptomycin-GentamicinSolution,100×
储存条件 -20℃,有效期1年
单位瓶
细胞培养基中有时加入适量浓度的抗生素,可以有效防止微生物的污染。目前,最常采用的抗生素为青霉素-链霉素混合溶液(100×双抗)。青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗)(Penicillin-Streptomycin-GentamicinSolution,100×)是专门用于细胞培养的三抗,经过滤除菌,可以直接添加到
1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗)哪里有买尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
1瓶 6T-CEM细胞株 6T-CEM 低温运输和保存
2 ug pALEX a pALEX a 低温运输,-20℃保存
50T 大肠埃希菌(大肠O157)stx1(282bp)和stx2(584bp)常规PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
PH7.0缓冲氯化钠蛋白胨溶液(USP) 英文名称: 产品规格:250g
1 管 SURE大肠杆菌 SURE E.coli Strain -80℃保存
化十六基三甲琼脂培养基(2015药典) Getrimide Agar 250g
紫蛋白胨培养液 用于消毒效果生物监测评价中指示菌的培养。(WS) 250g
2 ug pGenesil- 2 pGenesil- 2 低温运输,-20℃保存
2 ug pIC111 pIC111 低温运输,-20℃保存
250mL Sodium Phosphate Buffer(磷酸钠缓冲液),0.5M,pH7.6 Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.6 常温保存
萘啶酸(4.0mg) 英文名称:Nalidixic Acid 产品规格:4.0mg*5
100uL 卡拉霉素抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
50mL EGTA Solution(EGTA溶液),1M,pH7.4 EGTA Solution,1M,pH7.4 常温保存
锰盐营养琼脂平板 用于嗜温和嗜热需氧芽孢杆菌的检测。 90mmX20个
琼脂培养基N 英文名称:Agar medium N (Cetrimide agar) 产品规格:250g
2 ug pET-38b(+) pET-38b(+) 低温运输,-20℃保存
250mL NP40 Permeating Solution in PBS,10X(NP40渗透液,10X) NP40 Permeating Solution in PBS,10X 常温保存
青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗)哪里有买丹皮酚(标准品) Paeonol 552-41-0 质量规格:HPLC>98%,标准品
Icariin 羊藿苷 489-32-7 20mg
色甘酸钠(标准品) Cromolyn sodium 126-37-6 质量规格:HPLC>98%,标准品
Isoliquiritigenin 异甘草素 961-29-5 20mg
Enoxacin 依诺沙星 74011--8 1mg
DMEM-F-12 10×1L 盒
单壁碳纳米管(>55%) 小于2nm(直径),5-15μm(长度) Carbon Nanotube Single-walled (>55%) below 2nm(diam.), 5-15µm(length) 308068-56-6 质量规格:
铅屑(>99%,5N) Lead granules 7439-92-1 质量规格:>99%,5N
氘代-D6(25g) Benzene-D6 1076-43-3 质量规格:D,99.5%
猪血清 1ml 瓶
Casein 酪蛋白(不溶于中性水) 1g 瓶
头孢拉定 Cefradine 388-53-3 质量规格:>95%,BR
SABC(山羊IgG)-POD kit 12T 盒
二基亚砜(ACS,光谱级) Dimethyl sulfoxide 67-68-5 质量规格:ACS,光谱级
羊抗兔IgG-RBITC 5ml 支
神经肽Y(2-36),人,大鼠 Neuropeptide Y (2-36) (human,rat) 123139-39-9 质量规格:>95%,BR
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
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文献和实验溶液以及器材: 1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml 2、配三抗: 青霉素:100ku/L 链霉素:100ku/L 庆大霉素:100ku/L 3、培养液(M199+ECGS[3ug/ml]+15%胎牛血清)有EGF可以适当加点10ng/ml 4、大瓶生理盐水 5、广口瓶(脐带数+1) 6、止血钳(脐带数×2+2) 7、大针头数个(用于吸取生理
实验材料: 1. 角膜材料:可以取自人眼、兔眼或者牛眼,人眼材料最好来自胎儿; 2. 清洗液:不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2; 3. 特殊器械:虹膜恢复器; 4. 消毒液:1:5000的升汞溶液与100IU/ml的庆大霉素生理盐水; 5. 消化液:0.25%胰蛋白酶-0.01%EDTA混合溶液; 6. 培养液:基础液由DMEM培养基加入HEPES 6.0g/L、NaHCO3 2.2 g/L
板液体每孔在 2ml 左右,不宜太多,或者太少。取两个 1.5mlEP 管,记为 A 管,B 管,每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I,然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000,B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA(见买来的 siRNA 说明书),然后静置 5min,混合在一起,静置 20min,用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内,混匀; 将六孔板里的细胞的液体吸出,用 PBS 清洗两遍; 将 ABC 混合液 2ml
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