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- 文献和实验
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47
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详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
1.抗凝新生牛血(无菌)价格具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及研发性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
产品名称 抗凝新生牛血(无菌)价格
规格: 100ml
储存条件 2-8℃
单位 瓶
需要现采集,货期一周,保质期30天,现定现用。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
5mL PMSF 溶液,10mg/mL PMSF Solution -20℃保存
250mL RNase-Free Tris-HCl Solution(无RNase的Tris-HCl溶液),1M,pH7.4 RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH7.4 常温保存
马铃薯葡萄糖琼脂(USP)平板 9cm*10
80次 天净沙单细胞RNA扩增试剂盒 Single Cell WTA Kit -20℃保存
2 ug pLVX-TRE3G-Luc Control pLVX-TRE3G-Luc Control 低温运输,-20℃保存
50T 丙型肝炎病毒PCR基因分型测定试剂盒 低温运输,-20℃保存
支原体肉汤培养基 英文名称:Mycoplasma Broth Medium 产品规格:250g
1 管 JM110大肠杆菌 JM110 E.coli Strain -80℃保存
250ML MES Lysis Buffer with NP-40 MES Lysis Buffer with NP-40 常温保存
金黄色葡萄球菌检验检验培养基
胆盐乳糖培养基(BL) 用于药品中大肠杆菌和绿脓杆菌的增菌培养。(《中华人民共和国药典》2010年版) 250g
2 ug pGTf2 pGTf2 低温运输,-20℃保存
250mL Sodium Carbonate Bicarbonate,0.5M,pH8.5 Sodium Carbonate Bicarbonate,0.5M,pH8.5 常温保存
双歧杆菌琼脂培养基 英文名称:Bifidobacterium BS Medium 产品规格:250g
100次 植物种属鉴定PCR Mix 5(质体 psbK-I) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
1000mL Citrate Buffered Saline or SSC,20X,pH7.0 Citrate Buffered Saline or SSC,20X,pH7.0 常温保存
LB琼脂(lennox) 250g
抗凝新生牛血(无菌)价格L-天冬氨酸二叔丁基酯盐 L-Aspartic acid di-tert-butyl ester hydrochloride 1791-13-5 质量规格:>98%,BR
麝香酮(标准品) Muscone 541-91-3 质量规格:GC≥98%,标准品
血管紧张素I Angiotensin I human acetate salt hydrate 70937-97-2 质量规格:>97%,BR,人,醋酸盐
硫黄素 T(>%,BS) Thioflavin T 2390-54-7 质量规格:>%,BS
甘氨脱氧胆酸(GDCA) glycodeoxycholicacid 360-65-6 质量规格:>97%,一水物
高峰淀粉酶来源于米曲霉(40U/g) Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 91-19-8 质量规格:BR,40u/g
环孢菌素,环孢素A,环孢霉素A Cyclosporine A 59865-13-3 质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养
异辛醇(standard for GC, ≥99.5% (GC)) 2-Ethyl-1-hexanol 104-76-7 质量规格:standard for GC, ≥99.5% (GC)
西尼地平 Cilnidipine 132203-70-4 质量规格:>97%,BR,可用于细胞培养
酒石酸莫尼定(标准品) Brimonidine tartrate 70359-46-5 质量规格:HPLC>98%,标准品
谷氨酰转氨酶(纯酶) 5g 瓶
ML-176;SR-3335 SR3335;ML176 2933-05-6 质量规格:>98%
松果菊苷(标准品) Echinacoside 82854-37-3 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Cinobufagin 华酥毒基 470-37-1 20mg
Benzoylaconine 酰原碱 4-24-0 20mg
Epmedin C 朝藿定C 110642-44-9 20mg
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文献和实验正确使用抗凝剂 目前常用的抗凝剂有肝素,EDTA盐和枸橼酸盐,实验室应正确使用相应的抗凝剂,且标本采集时应注意血液与抗凝剂的比例。 (1)肝素:通常用肝素锂,浓度为14.3IU/mL血,医学教|育网搜集整理用量范围为12~30IU/mL,常用于血粘度测定,血气酸碱分析及酶学检查。 (2)EDTA盐:通常用EDTA-K2,浓度为1.5~2.0mg/dl,常用于全血细胞计数及血粘度测定。 (3)枸橼酸盐:通常用枸橼酸钠,浓度为109mmol/L
小板的聚集,从而阻止血液凝固。 2 两种抗凝剂的特点 EDTA 钾盐在血液中的溶解性更好,因而使用较多,尤其是二钾盐——EDTA-K2 可以通过喷雾干燥法附着在采血管的内表面,不会对采集的血液样品产生稀释。 EDTA 对血细胞形态的影响比较小,有较好的稳定性,但 EDTA 会抑制或干扰纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合,不适于血凝和血小板功能的检测,也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。 肝素 肝素螯合力低,对水分子运动的影响小,对血液成分的干扰少,不影响红细胞体积,不引起溶血,可谓优点
细胞因子能力和增殖能力等可能会与未动员外周血有一定差异。 1 原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同,在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此,可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。 2 方法 1) 取新鲜抗凝动员外周血,按照1:1比例加入1×稀释洗涤液,将血液进行稀释(以降低血液粘稠度),轻柔混匀,备用。 2) 向无菌离心管内加入适量的单个核细胞分离液,将稀释后的血样平铺到分离液液面上方(分离液:稀释动员外周血
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