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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
21
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
48T
是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因,是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因,因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测 的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据保守区域设计引物和探针,能专一性地检测出样品中的
成分,但不能检测其他非成分。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作,降低了交叉污染。
5. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研,足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
| 产品名称 | 阪崎肠杆菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法) |
| 规格 | 48T |
| 编号 | HE32150-R |
荧光化学物质:
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
荧光定量PCR服务:
简介:实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
>98%(GC)25g5ml化钙溶液(2.5mol/L,无菌)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPaseAR,99%>98%(GC)25gBrdU
>98%(GC)25g100g化钾溶液(1mol/L)DβHAR,99%>98%(GC)25gVIP
98%500g1g化钾溶液(3.5mol/L)TumorabnormalproteinCP,96%98%500gANG 1-7
98%100g25g化钾溶液(3.5mol/L,无菌)PHLDA2CP,98%98%100gAT1R
98%500g5g化锂溶液(
阪崎肠杆菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)酰肉转移酶cystathionine-β-lyase
(3-巯基基)三氧基硅烷nicotinamide phosphoribosyl transferase
(3-巯基基)三氧基硅烷heparanase
(3-巯基基)三氧基硅烷Hemolysin O
头孢菌素酶soluble Factor-related Apoptosis
头孢菌素酶soluble Factor-related Apoptosis ligand
GelRed核酸染料 histatin-5
溴化锂High mobility group protein
酰化白藜芦醇Claudin-2
酰化白藜芦醇Claudin
原理:
阪崎肠杆菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
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文献和实验我国广大婴幼儿群体的健康与安全。 三、阪崎肠杆菌检测必备仪器--荧光pcr仪: 实时荧光定量PCR检测系统也叫实时荧光定量核酸扩增检测系统(英文全名是Real-time Quantitative PCR Detection System),简称实时荧光qPCR,qPCR的核心是实时荧光定量PCR仪及与其配套的检测分析软件系统。 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction简称PCR)原理
法是一项新型的核酸扩增技术,一小时内可以检测出IHHNV结果。广州双螺旋基因技术有限公司根据恒温PCR原理,研发出Dhelix-C水产病害检测仪,配合使用恒温荧光法IHHNV核酸检测试剂盒,在65°C的恒温条件下反应,利用Bst DNA聚合酶完成置换扩增。反应体系中含有荧光染料,Dhelix-C水产病害检测仪能通过光学软件检测扩增后荧光信号的变化,将荧光信号表达为扩增曲线,同时仪器自动判读检测结果,从取样到结果显示仅需1~2个小时,仪器操作简单,非专业背景人员也可以轻松掌握,更适用于对虾IHHNV现场
方法没有离子辐射且价格便宜,其成本约为几千美元。这种装置的另一个优点是它的工艺及实施以常用的光盘和单元电话为基础的,从而简便、易行。 5.2 分子信标技术用于SARS的诊断 2003年SARS病毒在中国内地的出现以及在全球部分国家的肆意和传播,给人类健康提出了严峻的挑战。许多国家的科研人员都在开发快速和精确检测SARS病毒的方法和技术,诸如RT-PCR、ELISA、免疫荧光法等,并已经在推出相应的检测试剂盒。但是,目前这些检测仍然需要结合临床体征的判断,这主要是由于这几种方法还存在
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