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- 2025年07月15日
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39
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
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低温冷藏
- 规格：
环己酮
小肠结肠炎耶尔森氏菌（PCR-荧光探针法）简介：实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
| 产品名称 | 小肠结肠炎耶尔森氏菌（PCR-荧光探针法） |
| 规格 | 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管 |
| 编号 | HE32269-R |
荧光化学物质：
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下：
1. TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析，又可分析基因突变（SNP），有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标：是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近，不会产生荧光。PCR产物生成后，退火过程中，分子信标中间部分与特定DNA序列配对，荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
原理:
所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
四基化铵Creatine Kinase MB isoenzyme
四基碘化铵Peptidyl Prolyl Cis;Trans Isomerase NIMA Interacting Protein 1
四基碘化铵Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A
四基碘化铵Bone Sialoprotein
四基溴化铵Phospholamban
四基溴化铵HS1-associated protein X-1
四基溴化铵SERCA2α
四基化铵Dopa↨益闃招孩돁ú濄摯붚ᯧ栥荲뵧끖ƍ⪽쳷뵋ꖇ螺䰠ᅂ굁ᜐ谻
小肠结肠炎耶尔森氏菌（PCR-荧光探针法）99%100g1g硼酸钠溶液(1mol/L,pH8.0)malonylCoABR，99%99%100gPCPA
99%1g100g硼砂缓冲液(0.05mol/L,pH9.3-10.1)Indirect bilirubinBR，99%99%1gPON1
98%25g25g硼酸-硼砂缓冲液(pH7.4-9.0)prion virusBR，99%98%25gDA
98%5g5g硼酸缓冲盐溶液(0.015mol/L,pH8.5)SMAD-2BR，99%98%5gD1R
98%100g5g硼酸盐溶液(0.1mol/L,pH8.5-10)SMAD-7BR，98%98%100gD2R
98%1g1g硼酸盐缓冲液(BBS,pH8.0)Hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1BR，98%98%1gDBH;β-DH
95%25g5g硼酸盐缓冲液(BBS,pH8.4)Integrin Beta-Like Protein 1BR，98%95%25gDDC
95%5g1g硼酸标记缓冲液(pH9.2)islet cell autoantibodiesBR，98%95%5gDAT
95%1g5g羟胺溶液(1.5mol/L,pH8.0)Neuregulin 4BR，98%95%1gPARP
≥98%500mg250mg羟胺溶液(1.5mol/L,pH8.5)Angiotensin converting enzyme1BR，98%≥98%500mgPARP-1
产品及特点:
是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的成分，但不能检测其他非成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
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文献和实验成分 磷酸氢二钠(Na2HPO4 8.23g 磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O) 1.2g 氯化钠(NaCl) 5.0g 三号胆盐 1.5g 山梨醇 20g 制法 将磷酸盐及氯化钠溶于蒸馏水中，再加入三号胆盐及山梨醇，溶解后校正pH为7.6，分装试管，于121℃高压灭菌15min，备用。
耶尔森氏菌属包括11个种，其中对人有致病性的有三种：小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核菌和鼠疫菌。只有小肠结肠炎耶尔森氏菌和假结核菌已确定是食源性病原体。鼠疫耶尔森氏菌引起黑疽病，不通过食品传染。 1981年根据DNA以及生化和形态特征的相关资料，与小肠结肠炎耶尔森氏菌极为密切3个同源群被作为耶尔森氏菌的新种命名，它们是弗氏耶尔森氏菌（Y·frederiksenii）、中间型耶尔森氏菌
miRNA实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR从1996年美国Applied Biosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来，该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中，成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种：（1）TaqMan荧光探针法：该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时，荧光基团发光被淬灭基团吸收；在PCR扩增过程中，探针被降解，荧光基团与淬灭基团分离，发出可被检测到的荧光，以此来监测整个
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