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40
- 英文名:
WH-4-023
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:Lck/Src抑制剂(WH-4-023) 说明书
英文名称:WH-4-023
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
WH-4-023是一种有效的选择性的Lck/Src抑制剂,IC50分别为2nM/6nM,对p38α和KDR作用效果稍弱。
注本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号837422-57-8
别名DualLCK/SRCinhibitor
纯度99.47%
分子量568.67
储存条件-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
97%5gRBP
98%1gRBP-4
98%5gLEP
≥98%50MGACP
99%1gCML
99%5gDES
98%100gGSP
Lck/Src抑制剂(WH-4-023) 说明书沙氏葡萄糖琼脂250g用于化妆品中白色念球菌分离培养
去胆盐琼脂(DC) 1000(g) incubation media 去胆盐琼脂(DC) 1000(g)
半固体动力培养 Semi-Solid Agar 250克 细菌动力观察,菌种保存,H抗原位相变异试验等
糖肉汤250用于食品中沙门氏菌检验前增菌incubationmedia糖肉汤250用于食品中沙门氏菌检验前增菌
XLT4琼脂 250g 用于食品中致病菌,特别是沙门氏菌分离培养
RBL-1(大鼠嗜性粒细胞性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 PC-3(前列腺癌细胞)
CL-0183PA317(小鼠成纤维细胞)5×106cells/瓶×2
SELP Others Human SELP / selectin P / P-selectin 细胞裂解 (阳性对照)
3D4/21猪肺泡巨噬细胞 Porcine alveolar macrophage 3D4/21 1640+10% FBS+0.1mM NEAA+1mM
CF Protein Mouse 重组小鼠 CF / Ciliary Neuroophic Factor 蛋白 (His 标签)
小鼠肠粘膜上皮细胞完全培养 100mL
cis-α-Hydroxy Tamoxifen 97170-41-7 质量规格美国进口
Tamoxifen-N-oxide 75504-34-6 质量规格美国进口
α-Hydroxy Tamoxifen 97151-02-5 质量规格美国进口
N-Desmethyl-4'-hydroxy Tamoxifen 170171-12-7 质量规格美国进口
N-Desmethyl Tamoxifen Hydrochloride 15917-65-4 质量规格美国进口
(E)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen 114828-90-9 质量规格美国进口
4-Acetoxy Tamoxifen 76117-69-6 质量规格美国进口
N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (11 E/Z Mixture) 170171-12-7 (unlabeled) 质量规格美国进口
(Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers) 112093-28-4 质量规格美国进口
N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 11 E/Z Mixture) 110025-28-0 质量规格美国进口
(Z)-4-Hydroxytamoxifen 68047-06-3 质量规格美国进口
Teicoplanin A2 91032-26-7 质量规格美国进口
Tenofovir Phosphate 206646-04-0 质量规格美国进口
Mono-POC Tenofovir 211364-69-1 质量规格美国进口
N-Desmethyl Terbinafine 99473-11-7 质量规格美国进口
操作步骤(仅供参考):
1、Lck/Src抑制剂(WH-4-023) 说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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