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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 英文名:
Astragaloside IV
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:ERK1/2和JNK抑制剂(Astragaloside IV) 价格
英文名称:Astragaloside IV
产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
AstragalosideIV是从黄芪中分到的皂苷类物质,能够抑制ERK1/2和JNK的激活,在乳腺癌细胞MDA-MB-231中,能够下调(MMP)-2,(MMP)-9的信号通路。
注本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号84687-43-4
纯度99.15%
分子量784.97
储存条件-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
97%25gIL-2
97%5gIL-4
98%1gIL-6
98%25gEGF
98%5gLN
99%1gSOD
99%250mgHPR
ERK1/2和JNK抑制剂(Astragaloside IV) 价格1-(2-啶偶)-萘 855 GADD153(Growth arrest and DNA damage-inducible 153
1-(2-Pyridylazo)-naphthol分子式C15H11N3O分子量249.27 Galanin 神经节肽
1-(2-啶偶)-萘,α-啶偶-β-萘 galectin 9 半糖凝集素9(抗原
1-(2-啶偶)-萘 855 Galectin-3 半糖凝集素-3(抗原
1-(2-Pyridylazo)-naphthol分子式C15H11N3O分子量249.27 Gamma-Synuclein/SNCG 核突触蛋白-γ抗原
1-(2-啶偶)-萘,α-啶偶-β-萘 GAP-43 ( Growth associated protein-43
α-萘醌 1450 GAPDH 3-甘油脱酶(
α-Naphtholbenzein分子式C27H18O2分子量374.43 GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease
4-(4-羟-萘)亚(4H)-萘, α-萘萘醌,4,4’-(α-羟亚苄)二(1-萘),α-萘醌 Gastrin 胃泌素(抗原
α-萘醌 1450 Gastrin(human
α-Naphtholbenzein分子式C27H18O2分子量374.43 GATA-3(GATA binding factor 3
4-(4-羟-萘)亚(4H)-萘, α-萘萘醌,4,4’-(α-羟亚苄)二(1-萘),α-萘醌 GATA-4(GATA binding factor 4
4-(2-噻唑偶)间二 22466-0 Gax(growth arrest-specific homeobox
4-(2-Thiazolylazo)resorcinol分子式C9H7N3O2S分子量221.24 GCS (glucosylceramide synthase, GCS
4-(2-噻唑偶),3-二, 4-(2'-噻唑偶)间二, 4-(2-噻唑偶)间二 GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8
操作步骤(仅供参考):
1、ERK1/2和JNK抑制剂(Astragaloside IV) 价格贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验同时,Apaf―1可以激活原形的caspase―9,形成细胞色素C/Apaf―1/caspase―9复合体,即凋亡复合体(apoptosome)。该复合体水解并激活下游的caspase通路如caspase―3等。 凋亡复合体的形成是凋亡信号启动的关键步骤。目前发现激活的癌基因可以辅助凋亡复合体的形成,比如腺病毒EIA可以上调Apaf―1和caspase―9,E2F1可以上调Apaf―1的表达。Apaf―1的释放可促进凋亡复合体的形成,对凋亡的启动起促进作用。目前的研究认为,细胞
单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)简介
是一个2G纯合体,具有高水平的MMP-1组成型表达.Tower et al[172]利用Northern blotting,Western blotting,荧光素酶活性分析和PCR为基础的定点突变方法研究发现,如果加入一个针对ERK途径的特异性抑制剂PD098059,则MMP-1的表达受阻,由此可见ERK1/2途径主要以MMP-1的2G多态型为靶点,促进MMP-1基因的转录,从而提高相应肿瘤细胞的转移能力.Tower et al[174]再次用乳腺癌细胞MCF-7/ADR研究发现,AP-1位点
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