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Cytiva
- 规格:
10 × 300 mm
概述
Superdex™ 75 Increase 10/300 GL、5/150 GL 和 3.2/300 是适用于凝胶过滤层析应用的多功能预填充柱。层析柱预期用于分子量在 Mr 3000 和 70000 之间的蛋白(如重组标签蛋白质)的制备级纯化以及表征和分析。
- 与上一代 Superdex™ 75 相比,分辨率增加高达 50%,从而改善了纯度和分析结果。
- 与上一代 Superdex™ 75 相比,运行时间缩短至三分之一,并可保持快速结果的分辨率。
- 广泛用于制备和分析应用,尤其是重组标签蛋白质。
- 与上一代 Superdex™ 75 相比,批次间一致性更高。
- 可耐受高 pH 值条件下的反复苛刻清洁程序,从而确保较长的层析柱使用寿命并尽可能地减少残留。
与上一代产品相比,分辨率更高和/或运行时间更短
Superdex™ 75 Increase 属于新一代琼脂糖基 SEC 介质,与其上一代 Superdex™ 75 相比,其粒径更小、刚性更高、粒度分布更窄且选择性更高,因此性能更高。
在位清洁,以供多用途使用
Superdex™ 75 Increase 填料耐碱。因此,可以在碱性条件下对层析柱进行在位清洁,以允许将相同层析柱用于不同蛋白,且尽可能降低样本之间的残留风险。耐碱性是基于琼脂糖的填料与基于二氧化硅的填料的区别所在。在苛刻的碱性条件下清洁填料也可确保层析柱寿命较长。
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- 作者
- 内容
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文献和实验Stephens, A. D., Matak-Vinkovic, D., Fernandez-Villegas, A., & Kaminski Schierle, G. S. (2020). Purification of recombinant α-synuclein: a comparison of commonly used protocols. Biochemistry, 59(48), 4563-4572.
柱体积 30%。 分子筛 膜蛋白的纯化流程中,分子筛是理想化的最终步骤。不仅可以去除聚集体以及与目的蛋白大小不同的杂质,还可以进行缓冲液更换。这些因素往往能够决定后续的结构测定是否顺利。 推荐使用高分辨率分子筛大体积预装柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL 和 Superose 6 Increase 10/300 GL。其最大上样量可达 500μL。 案例分析 外膜蛋白 A (Outer membrane protein A, OmpA) 是革兰氏阴性菌外膜蛋白质的主要
5 ml 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 ml 两种常用柱型。最终上样体积不要超过柱体积 30%。 分子筛 膜蛋白的纯化流程中,分子筛是理想化的最终步骤。不仅可以去除聚集体以及与目的蛋白大小不同的杂质,还可以进行缓冲液更换。这些因素往往能够决定后续的结构测定是否顺利。 推荐使用高分辨率分子筛大体积预装柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL 和 Superose 6 Increase 10/300 GL。其最大上样量可达
较高的蛋白首先使用 Capto S 进行阳离子交换粗纯,由于大部分宿主蛋白杂质带负电,会从阳离子柱上流穿,因此 Capto S 可以除掉绝大多数的背景蛋白。 然后使用 Superdex 75 10/300 GL分子筛进行精细纯化,此步可以去聚集体或痕量小分子杂质,至此就可以得到较纯的天然蛋白组分了。 Capto 系列的离子交换和疏水填料都拥有高动态载量,高流速,高化学耐受性的特点,可以在更短的时间完成更高处理量的纯化实验,时间和经济成本都可节省。 相信你已经get 到了天然蛋白纯化的精髓
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