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Porcine IL-1β E
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猪血清、血浆或细胞培养上清液
猪白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测猪血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA试剂盒。
双抗体夹心ELISA法
69pg/ml
96次
碧云天的Porcine IL-1β ELISA Kit (Porcine Interleukin 1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即猪白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测猪血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA试剂盒。本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为69pg/ml,与猪的IL-1α、IL-1ra及人的IL-1β等均没有交叉反应,与大鼠、小鼠的IL-1β分别有1.4%、0.39%的交叉反应性。板内、板间变异系数均小于10%。Interleukin-1即白细胞介素-1(简称白介1,IL-1),其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。IL-1主要由巨噬细胞产生,此外几乎所有的有核细胞,如B细胞、NK细胞、体外培养的T细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。血液中的IL-1主要是由单核细胞和巨噬细胞所产生的IL-1β。IL-1α和IL-1β在结构上有一定的相似性并且在氨基酸水平有25%的同源性。两者由不同的基因分别编码产生约31kDa大小的前体蛋白,并分别剪切成约17.5kDa大小的成熟蛋白。IL-1α的前体蛋白有一定的生物活性,而IL-1β的前体蛋白几乎没有生物学功能,所以其被Caspase-1/ICE剪切得到成熟的IL-1β是一个非常关键的步骤。在大多数情况下,IL-1α和IL-1β以同样的亲和力结合于相同的细胞表面受体,发挥相同的生物学作用。IL-1有两种跨膜受体蛋白,一种是分子量约为80kDa的IL-1 RI (IL-1 receptor, type I),其主要表达在T细胞、成纤维细胞、角质细胞、内皮细胞、滑膜细胞、软骨细胞及肝细胞中;另一种是分子量约为68kDa的IL-1 RII (IL-1 receptor, type II),其主要表达在B细胞、嗜中性粒细胞及骨髓细胞中。IL-1主要激活NF-κB信号通路调控炎症因子的表达。IL-1和其受体结合后,激活下游一系列蛋白如JNK、p38、ERK1/2,及NF-κB和c-Jun。IL-1的信号通路见图1。
图1. IL-1的信号通路示意图。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中猪IL-1β的浓度,其原理见图2。猪IL-1β特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的猪IL-1β会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗猪IL-1β抗体后,生物素化抗猪IL-1β抗体与猪IL-1β结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。猪IL-1β浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中猪IL-1β浓度。
图2. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。包装清单:
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