Mouse SAA ELISA Kit

碧云天的Mouse SAA ELISA Kit (Mouse Serum Amyloid A Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠血清淀粉样蛋白A酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的SAA的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为245pg/ml，与人SAA1、SAA2、SAA3，小鼠SAA3等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
血清淀粉样蛋白A家族(Serum Amyloid A proteins,SAAs)与高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)同属于载脂蛋白类。SAAs家族可被分为两类，第一类是急性时相蛋白SAA1和SAA2，在受到促炎性细胞因子刺激后，其在肝脏中的浓度会迅速升高，SAA1和SAA2浓度的升高不仅与急性炎症有关，一些慢性炎症疾病，例如肿瘤、动脉粥样硬化和代谢综合征也会导致其浓度升高。第二类则是表达固定的SAA4和SAA5，在正常情况下这类蛋白含量大约占总体SAA家族的90%以上。成熟的小鼠SAA1与人、兔子和马SAA1分别具有72%、72%和67%的序列相似性，与小鼠SAA2、SAA3和SAA4分别具有91%、70%和54%的序列相似性。在炎症期间，血液中循环的SAA1浓度会上升1000倍左右，SAA1以12kDa非糖基化蛋白分泌出来，是HDL复合物的重要组成部分。炎症期间，SAA1替代ApoA1，是HDL中最主要的载脂蛋白，减弱了HDL对胆固醇的反向运输作用。SAA蛋白能够与革兰氏阴性菌结合，从而协助巨噬细胞对细菌的清除，还能够作为视黄醇和视黄酸的结合蛋白。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠SAA的浓度，其原理见图1。小鼠SAA特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的小鼠SAA会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠SAA抗体后，生物素化抗小鼠SAA抗体与小鼠SAA结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠SAA浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中小鼠SAA浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PS823-1	小鼠SAA抗体预包被板	8孔×12条
PS823-2	标准品稀释液(5X)	10ml
PS823-3	小鼠SAA标准品	2-4瓶
PS823-4	小鼠SAA生物素化抗体	10ml
PS823-5	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PS823-6	洗涤液(20X)	30ml
PS823-7	TMB溶液	10ml
PS823-8	终止液	5ml
PS823-9	封板膜(透明)	2张
PS823-10	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组份4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组份严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。