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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
428
- 英文名:
Protein Marker(43-200kD)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
- 规格:
10次
特别提示:包括蛋白marker(43~200kD)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:蛋白marker(43~200kD)
英文名称:Protein Marker(43-200kD)
产品货号:BTN70102C
产品规格:10次
本产品为蛋白质电泳标准系列,为已知的标准蛋白质混合物,在SDS-PAGE时可以作为分子量标准,估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:
1.简单,不需要自己单独购买各种蛋白质配置。
2.本产品有粉末型和溶液型两种,十分稳定。
3.本系列三种产品涵盖从 3.3 KD-200 KD的分子量范围。
| 所含成分及其分子量 | A型 | B型 | C型 | |
| 肌球蛋白重链 | 200.0KD | 有 | ||
| 钙调素结合蛋白 | 130.0KD | 有 | ||
| 兔磷酸化酶B | 97.4KD | 有 | 有 | |
| 牛血清白蛋白 | 66.2KD | 有 | 有 | |
| 兔肌动蛋白 | 43.0KD | 有 | 有 | |
| 牛碳suān酐酶 | 31.0KD | 有 | ||
| 人生长激素 | 22.0KD | |||
| 大豆胰蛋白酶抑制剂A | 20.1 KD | 有 | 有 | |
| 鸡蛋清溶菌酶 | 14.4KD | 有 | 有 | |
| 人工合成肽1 | 7,823D | 有 | ||
| 人工合成肽2 | 5,856D | 有 | ||
| 人工合成肽3 | 3,313D | 有 | ||
产品组成:
| 成分 | A型 | B型 | C型 |
| 蛋白分子量标准A型(低分子量) | 15T | - | - |
| 蛋白分子量标准B型(中分子量) | - | 20T | - |
| 蛋白分子量标准C型(高分子量) | - | - | 10T |
| 1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
使用方法:
一、干粉型的使用:
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70102A)需要150μL。
中分子量标准(BTN70102B)需要200μL。
高分子量标准(BTN70102C)需要100μL。
2.沸水浴中加热 5分钟。
3.短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
4.使用时每次取一管,室温放置直到液体融化后,沸水浴中加热3~5分钟,即可上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
5.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用:
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
疑难解答:
1.分子量不同,SDS-PAGE的分离胶和浓缩胶浓度不同。需要自己根据具体情况调整。
2.电泳之后可将胶进行染色观察,如果使用传统配方进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的一步式蓝色PAGE染液(BTN61204),该产品具有染色快,无毒,灵敏性高等物点,是常规蛋白染色液的替代品。
我公司销售的蛋白marker(43~200kD)价格,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验酶活性更强,需要注意抑制蛋白酶的活性(加入PMSF和蛋白酶抑制剂 cocktail),封闭剂一般5%脱脂奶粉较常用。如果一抗为多克隆抗体,使用BSA也是不错的选择。O. 您是否可以介绍一下大分子量蛋白200KD,在做western要注意什么呢?解答:做200kd蛋白的Western Blot时要注意,分离胶最好选择>7%的;剥胶时要小心;转移时间需要相应延长;要做分子量参照(否则出现杂带不知道如何分析)。P. 有什么方法可以提高上样量?解答:可以浓缩样品;增大上样体积来增大上样量。Q. 我要检测的目的
我是一个门外汉,刚刚做WB。做出来后全是模糊的片子,还有就是只有黑点,没有条带。一直没找到原因。恳请各位高人教导。并且按照以下的方法做。我做的是SD大鼠骨骼肌组织的蛋白检测,取300mg肌肉,最终加2.4ML裂解液。10000转离心10分钟。定蛋白也是按一下方法。上样按每10微升80微克蛋白上的样。用的是大连竞迈公司的垂直电泳仪。装模是半干法,按没分钟1KD转的。一抗1:1000.二抗1:6000。。 我测的蛋白在95KD左右,一半装2-2.5小时。但是结果不是背景强就是没东西。而且经常
) 2.9g Tris(MW121.14) 5.8g SDS 0.37g 甲醇 200ml 蒸馏水至 1000ml 溶解后室温保存,次溶液可重复使用 3~5 次。 10X 丽春红染液 丽春
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