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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
106
- 适应物种:
人/大鼠/动物/植物
- 应用:
科研研究实验使用
- 检测方法:
ELISA法
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1580.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1980.0 |
植物磷酸烯醇式丙TONG酸羧化酶(PEPC)ELISA kit操作事项
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植物磷酸烯醇式丙TONG酸羧化酶(PEPC)ELISA kit操作事项ELISA是什么?将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。
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文献和实验一、包被抗原 1. 用 50mM 的碳酸盐包被缓冲液 (pH 9.6) 溶解抗原, 使抗原浓度为 10-20 μg/ml,加 100 μ l/孔到 96 孔酶标板,4℃放置过夜。 2. 第二天弃去包被液后,用 PBST 洗涤 3 次,每孔加入 150 μ l 1% BSA 37℃封闭 1 小时。 3. PBST 洗涤 3 次后,每孔加入 100 μl 不同倍比稀释度的血清,并加入对照样品,37 ℃ 孵育 2 小时。 4. PBST 洗涤 5 次后, 加入100μ l 稀释
、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。 1 标本及采集、贮运因素 严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳
后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。二、操作步骤方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1、 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml.在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液
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