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- 2025年07月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100T
实验报告：
一、EB染色液价格分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：EB染色液价格
英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
EB染色液可用于细胞凋亡检测，也可用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。EB不能穿过活细胞的细胞膜，然而可以通过死细胞破损的细胞膜而对细胞核DNA染色。EB含有一个可以嵌入的堆积碱基之间的一个平面基团，这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致染料与DNA结合并呈现荧光。
储存条件4℃避光保存。
有效期一年。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
(3--2-)醇MIP-5 (human) (Macrophage Inflammatory Protein-5)
4-溴-2--6-Mitochondria
3--2,6-二MMP-1 (human) Elisa
6--2--3-苄MMP-13 (human) Elisa
3-哒嗪盐盐MMP-9 (human) Elisa
6--2--3-Morphine (serum/blood) Elisa
3--4--DL-甘Morphine (urine) Elisa
1-(2,6-二-3-)Morphine / Opiates Drug Screen cassettes
2,3-二-4-苄Mouse Isotyping test
2,6-二-3-苄MPO (Myeloperoxidase) Elisa
EB染色液价格曲安奈德英文名(EN)Strontium zirconate特价促销 规格(SP)250G
曲安奈德（标准品）英文名(EN)Strontium bromide hexahydrate特价促销 规格(SP)25G
曲普瑞林英文名(EN)Strontium fluoride特价促销 规格(SP)10G
去皮质 英文名(EN)Strontium oxide,≥97.0%特价促销 规格(SP)100G
去皮质(标准品)英文名(EN)Strontium hydroxide特价促销 规格(SP)25G
舍莫瑞林 英文名(EN)Strontium Carbonate,≥99.特价促销 规格(SP)25G
特立帕肽/重组状旁激素(14)英文名(EN)Mercuric ammonium chloride,≥ 98.0%特价促销 规格(SP)25G
西曲瑞克英文名(EN)Mercurous sulfate,≥ 99.0 %特价促销 规格(SP)100G
（标准品）英文名(EN)Mercuric chloride,≥ 99.5%特价促销 规格(SP)100G
（二水）英文名(EN)Mercuric sulfate,≥ 99.5%特价促销 规格(SP)100G
胸肽β4 英文名(EN)Mercuruy特价促销 规格(SP)100G
依降钙素 英文名(EN)Bis(triphenylphosphoranylidene)ammoniu...特价促销 规格(SP)5G
胰高血糖素英文名(EN)Tetrabutylammonium nitrate特价促销 规格(SP)5G
优力司特；乌利司他英文名(EN)Tetraethylammonium nitrate特价促销 规格(SP)5G
增血压素英文名(EN)Tetramethylammonium nitrate, 特价促销 规格(SP)25G
组瑞林 英文名(EN)Triethylmethylammonium chloride特价促销 规格(SP)25G
达比加群英文名(EN)Benzyltributylammonium bromide,≥98.5 %特价促销 规格(SP)10G
达比加群英文名(EN)Benzyltributylammonium chloride特价促销 规格(SP)100G
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
一、EB染色液价格分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：EB染色液价格英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
EB染色液可用于细胞凋亡检测，也可用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。EB不能穿过活细胞的细胞膜，然而可以通过死细胞破损的细胞膜而对细胞核DNA染色。EB含有一个可以嵌入的堆积碱基之间的一个平面基团，这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致染料与DNA结合并呈现荧光。
储存条件4℃避光保存。
有效期一年。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
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本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
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4-溴-2--6-Mitochondria
3--2,6-二MMP-1 (human) Elisa
6--2--3-苄MMP-13 (human) Elisa
3-哒嗪盐盐MMP-9 (human) Elisa
6--2--3-Morphine (serum/blood) Elisa
3--4--DL-甘Morphine (urine) Elisa
1-(2,6-二-3-)Morphine / Opiates Drug Screen cassettes
2,3-二-4-苄Mouse Isotyping test
2,6-二-3-苄MPO (Myeloperoxidase) Elisa
EB染色液价格曲安奈德英文名(EN)Strontium zirconate特价促销 规格(SP)250G
曲安奈德（标准品）英文名(EN)Strontium bromide hexahydrate特价促销 规格(SP)25G
曲普瑞林英文名(EN)Strontium fluoride特价促销 规格(SP)10G
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（标准品）英文名(EN)Mercuric chloride,≥ 99.5%特价促销 规格(SP)100G
（二水）英文名(EN)Mercuric sulfate,≥ 99.5%特价促销 规格(SP)100G
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优力司特；乌利司他英文名(EN)Tetraethylammonium nitrate特价促销 规格(SP)5G
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培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验相关实验
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