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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
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22
- 英文名：
BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ml
中文名称：BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒哪家好
英文名称：BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit
产品规格：共100ml
发货周期：1～3天
BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。
BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
本试剂盒可以用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定，也可以用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
组份规格
试剂A碱性磷酸酯酶显色缓冲液100ml
试剂BBCIP溶液(300X)350μl
试剂CNBT溶液(150X)700μl
使用说明
1.对于组织切片或细胞样品或膜，在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5分钟。对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5分钟。
2.按照如下比例依次加入各溶液，混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液，配方如下试剂A碱性磷酸酯酶显色缓冲液3mL试剂BBCIP溶液(300X)10μL试剂CNBT溶液(150X)20μL染色工作液总体积3.03mL
3.最后一次洗涤完毕后，去除洗涤液，加入适量BCIP/NBT染色工作液，确保能充分覆盖样品。
4.室温避光孵育5-30分钟或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深浅。
5.去除BCIP/NBT染色工作液，用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应。
6.对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，如有必要可以用中性红染色液(neutralredstainingsolution)染色，以便于观察。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。
储存4℃，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
3-溴-4-三啶Vitamin Niacin
5--2,4-二羟啶VMA (vanyl mandelic acid)
4'-酰West Nile IgG Elisa
2'-酰酰Yersinia enterolitica IgA, Elisa
2-扁桃Yersinia enterolitica IgG, Elisa
1-邻双胍Yersinia enterolitica IgM, Elisa
3,4-二羟二Zeta Globin Elisa
醌二(2-羟)Zona Pellucida Ab Ig-Typing
8-溴-3--3,7-二嘌呤-2,6-二大鼠解偶联蛋白1(UCP1)ELISA 试剂盒
2-(砜)盐盐人和肽素(copeptin)ELISA 试剂盒
BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒哪家好CBZD亮英文名(EN)Trimethylacetaldehyde,96%特价促销 规格(SP)5ML
CBZD缬英文名(EN)3,4,5Trimethoxybenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)25G
CBZL焦谷英文名(EN)2,4,5Trimethoxybenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)5G
CBZL赖盐盐;N(ε)羰L赖盐盐英文名(EN)2Chloronitrobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)10G
CbzL苏英文名(EN)Chloroacetaldehyde dimethyl acetal,≥特价促销 规格(SP)25G
Celite 硅藻土 545(助滤剂,碳处理,通量煅烧)英文名(EN)3,5Dibromosalicylaldehyde,98%特价促销 规格(SP)10G
Celite® 硅藻土545(助滤剂,通量煅烧（filter aid,flux calcined）)英文名(EN)3,5Dichlorosalicylaldehyde,特价促销 规格(SP)5G
Celite硅藻土，洗(用于总膳食纤维含量分析,TDF00A)英文名(EN)5Chlorosalicylaldehyde,98%特价促销 规格(SP)10G
CEP8770英文名(EN)3,5Dichlorobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
CHAPS;3[3(胆)二]英文名(EN)2,3Dichlorobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)25G
CHAPSO；3[(3胆固)二]羟英文名(EN)2,5Dihydroxybenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)1G
CHIR99021 (CT99021.HCl)英文名(EN)2,4Dihydroxybenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)25G
ChirabiteAR[用于核磁共振]英文名(EN)2Quinolinecarboxaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
CHPSNa；3羟英文名(EN)2,5Difluorobenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)1G
CLA (>98.0%(HPLC))英文名(EN)3Methoxybenzaldehyde,特价促销 规格(SP)25G
Corylifol A(标准品)英文名(EN)2Methoxybenzaldehyde,≥特价促销 规格(SP)25G
CPC一水合物(=西铵一水合物)(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)4(Diphenylamino)benzaldehyde,特价促销 规格(SP)5G
Crovatin英文名(EN)3,5Ditertbutylhydroxybenzaldehyd...特价促销 规格(SP)5G
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
英文名称：BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit
产品规格：共100ml
发货周期：1～3天
BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。
BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
本试剂盒可以用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定，也可以用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
组份规格
试剂A碱性磷酸酯酶显色缓冲液100ml
试剂BBCIP溶液(300X)350μl
试剂CNBT溶液(150X)700μl
使用说明
1.对于组织切片或细胞样品或膜，在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5分钟。对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5分钟。
2.按照如下比例依次加入各溶液，混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液，配方如下试剂A碱性磷酸酯酶显色缓冲液3mL试剂BBCIP溶液(300X)10μL试剂CNBT溶液(150X)20μL染色工作液总体积3.03mL
3.最后一次洗涤完毕后，去除洗涤液，加入适量BCIP/NBT染色工作液，确保能充分覆盖样品。
4.室温避光孵育5-30分钟或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深浅。
5.去除BCIP/NBT染色工作液，用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应。
6.对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，如有必要可以用中性红染色液(neutralredstainingsolution)染色，以便于观察。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。
储存4℃，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：1．BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
3-溴-4-三啶Vitamin Niacin
5--2,4-二羟啶VMA (vanyl mandelic acid)
4'-酰West Nile IgG Elisa
2'-酰酰Yersinia enterolitica IgA, Elisa
2-扁桃Yersinia enterolitica IgG, Elisa
1-邻双胍Yersinia enterolitica IgM, Elisa
3,4-二羟二Zeta Globin Elisa
醌二(2-羟)Zona Pellucida Ab Ig-Typing
8-溴-3--3,7-二嘌呤-2,6-二大鼠解偶联蛋白1(UCP1)ELISA 试剂盒
2-(砜)盐盐人和肽素(copeptin)ELISA 试剂盒
BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒哪家好CBZD亮英文名(EN)Trimethylacetaldehyde,96%特价促销 规格(SP)5ML
CBZD缬英文名(EN)3,4,5Trimethoxybenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)25G
CBZL焦谷英文名(EN)2,4,5Trimethoxybenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)5G
CBZL赖盐盐;N(ε)羰L赖盐盐英文名(EN)2Chloronitrobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)10G
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Celite® 硅藻土545(助滤剂,通量煅烧（filter aid,flux calcined）)英文名(EN)3,5Dichlorosalicylaldehyde,特价促销 规格(SP)5G
Celite硅藻土，洗(用于总膳食纤维含量分析,TDF00A)英文名(EN)5Chlorosalicylaldehyde,98%特价促销 规格(SP)10G
CEP8770英文名(EN)3,5Dichlorobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
CHAPS;3[3(胆)二]英文名(EN)2,3Dichlorobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)25G
CHAPSO；3[(3胆固)二]羟英文名(EN)2,5Dihydroxybenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)1G
CHIR99021 (CT99021.HCl)英文名(EN)2,4Dihydroxybenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)25G
ChirabiteAR[用于核磁共振]英文名(EN)2Quinolinecarboxaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
CHPSNa；3羟英文名(EN)2,5Difluorobenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)1G
CLA (>98.0%(HPLC))英文名(EN)3Methoxybenzaldehyde,特价促销 规格(SP)25G
Corylifol A(标准品)英文名(EN)2Methoxybenzaldehyde,≥特价促销 规格(SP)25G
CPC一水合物(=西铵一水合物)(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)4(Diphenylamino)benzaldehyde,特价促销 规格(SP)5G
Crovatin英文名(EN)3,5Ditertbutylhydroxybenzaldehyd...特价促销 规格(SP)5G
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验相关实验
漂洗10～30min。 （12）2×SSC（含20μg/mlRNaseA, 适于RNA探针）冲洗30min，37℃。 （13）1×SSC，0.1×SSC,37℃各漂洗10～30min。 （14）0.05mol/l PBS 冲洗4×5min。 （15）3%BSA（0.4%Triton X-100 PBS配）37℃保温30min。 （16）Avidin �AKP(碱性磷酸酶)（1：500～1：100，0.4%Triton X-100 PBS配）室温1～3h
,Santa Cruz等公司的原装抗体或进口分装抗体.具体请参见免疫学部分产品----第一抗体. C.标记二抗: 根据一抗的来源选择二抗. 购买信息: 请参见免疫学部分试剂---各种标记抗体 D.底物系统: 采用常规底物或化学发光底物. (1)显色法: 常用底物为BCIP/NBT或DAB .此法简单,但灵敏度不高,并难以从膜上去除. (2)化学发光法: 目前比较常用的方法.灵敏度较高,检测时可采用X光胶片或CCD成像系统. 不同显色方法产品比较
货号 品名 规格 价格 备注 C1601 BCIP/NBT显色试剂盒 - 深蓝色 50ml 240 Sigma原料，单一组分 C1603 单组分pNPP 显色液 - 黄色
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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