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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
127
- 英文名:
Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
>100次
特别提示:包括线粒体膜电位检测试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:线粒体膜电位检测试剂盒
英文名称:Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1
产品货号:YT148
产品规格:>100次
本试剂盒是一种以JC-1为荧光探针,快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒,可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-1为单体(monomer),可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1单体的最大激发波长为514nm,最大发射波长为529nm;JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm,最大发射波长为590nm。实际观察时,使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品,本试剂盒共可以检测100个样品;对于12孔中的样品,本试剂盒共可以检测200个样品。
试剂盒组分:
JC-1(200X)——————100μl/管,共5管
超纯水————————90ml
JC-1染色缓冲液(5X)——80ml
CCCP(10mM)——————20μl
注意事项:
1. JC-1(200X)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2. 必须先把JC-1(200X)用试剂盒提供的超纯水充分溶解混匀后,才可以加入JC-1染色缓冲液(5X)。不可先配制JC-1染色缓冲液(1X)再加入JC-1(200X),这样JC-1会很难充分溶解,会严重影响后续的检测。
3. 装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液(1X)洗涤时,使JC-1染色缓冲液(1X)保持4℃左右,此时的洗涤效果较好。
4. JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
5. 请勿把JC-1染色缓冲液(5X)全部配制成JC-1染色缓冲液(1X),本试剂盒使用过程中需直接使用JC-1染色缓冲液(5X)。
6. 如果发现JC-1染色缓冲液(5X)中有沉淀,必须全部溶解后才能使用,为促进溶解可以在37℃加热。
7. CCCP为线粒体电子传递链抑制剂,有毒,请注意小心防护。
储存条件:-20℃。
我公司销售的线粒体膜电位检测试剂盒北京现货,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验GCaMP蛋白的特性(Douglas S. Kim, et al., Nature, 2013)2、jGCaMP7家族:jGCaMP7(Janelia GCaMP7,区别于过去出现过的G-CaMP7)。包括四类不同特点的蛋白:jGCaMP7s、jGCaMP7f、jGCaMP7b、jGCaMP7c(图5)。jGCaMP7s高敏感;jGCaMP7f具有快速动力学曲线,适用于更强的检测单动作电位反应或群里活动实验;jGCaMP7b具有较明亮的背景荧光,适用检测神经元突起或神经纤维;jGCaMP7c的本底荧
,不过非特异性会要高一点。 解决方法:摸索一下一抗和二抗的浓度,二抗千万不能加太多。洗涤步骤要严格,加完一抗和二抗后都要洗三遍,在EP管中进行,在96孔板里虽快,但非特异性会比较高;一抗冰浴30分,二抗冰浴20分钟染色。 25、JC-1测淋巴细胞线粒体膜电位问题: 问:我想用JC-1测外周血淋巴细胞线粒体膜电位,国内有文章说: (1)用5ml注射器抽取适量肝素,再抽取患者静脉血2.5ml,PBS溶液稀释一倍,沿装有等量淋巴细胞分离液的试管管壁缓慢加至液面上层,保持两液面清晰,2000转/分离心20
的经验,而在荧光2高度图上,因为是用的是对数,所以可以把凋亡和坏死拉开,凋亡峰在不同的细胞周期特异性细胞凋亡时,都特异性的出现在10的2次方荧光道数处,坏死在10的1次方处,从而可以清楚的分清它们。核染色剂(核染料) yuanaiyu:用流式细胞仪测脑组织细胞悬液中细胞线粒体的膜电位,需先将细胞与细胞碎片区分开来,现考虑用一种亲细胞核的染料将细胞分选出来,已尝试用过PI,但pI分子量大,过分破坏细胞膜而影响了线粒体膜电位。请问有没有一种小分子的核染料,既能进入细胞核又对对细胞膜的影响很小
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