Pfu DNA 聚合酶价格

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百奥莱博专业生产供应Pfu DNA 聚合酶价格，我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂，同时价格极具竞争力，满心期待您的咨询订购。

名称：Pfu DNA 聚合酶价格
产地：国产|进口
英文名：Pfu DNA Polymerase
规格：500U|1000U|10KU
本公司生产的Pfu DNA Ploymerase是从克隆有Pyrococcusfuriosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白，其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错配，而传统的Taq酶却不能，其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等虽具有校正功能，但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性，PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟，比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好，95℃ 1小时仍保持90%以上的活性，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端，可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。

Pfu来源：表达Pfu DNA聚合酶的大肠杆菌。
Pfu酶储存缓冲液：50mMTris-HCl，pH 8.2;0.1mM EDTA;1mM DTT;0.1% Nonidet P40;0.1% Tween 20;50% 甘油。
Pfu单位定义：在74℃条件下，30分钟内催化10 nmmoldNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需要的酶量为一个单位。
Pfu用途：1)常规PCR反应中的DNA高保真体外扩增;
2)基因定点突变和拼接。
Pfu注意事项：
1、 酶浓度：建议在50ml的体系中使用1.25个单位的Pfu DNA聚合酶，因为酶存在3’-5’外切酶活性，高浓度的酶可能会增加降解引物的可能性。最好在加完dNTP后再添加Pfu DNA聚合酶。并在有冰浴的条件下混合PCR反应中的各种成分。
2、延伸时间：Pfu DNA聚合酶的延伸速率低于Taq DNA聚合酶，大约为一分钟600个碱基(Taq DNA聚合酶大约为一分钟2000个碱基)，因此建议扩增1Kb的DNA用两分钟的延伸时间。对于大多数的反应而言，25～35个扩增循环就足够了。
Pfu保存：-20℃保存至少一年。

别名：Pfu DNA 聚合酶
英文名称：Pfu DNA Polymerase
储存条件：-20
性状：液体

除Pfu DNA 聚合酶价格外，我公司正在打折促销以下产品：

·胶原蛋白酶Ⅳ
编号：QN0514
英文名称：CollagenaseⅣ
规格：100mg
胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。消化过程中可以搅拌以促进酶的消化。胶原酶在消化的过程中可以引起细胞的少量死亡，一般消化时间为15min至数小时。如果浓度发生变化那么消化时间可能更长。消化过程中首选的缓冲液为含*离子和BSA的Krebs Ringer Buffer。在消化的过程中如果细胞大量死亡则需要降低酶量，同时可以加入0.5%的BSA或5～10%血清来稳定细胞的状态和消化效果。

别名：梭菌肽酶 A
CAS号：9001-12-1
来源：溶组织梭菌
使用浓度：0.1～5 mg/ml
纯度：0.5～5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid
性状：棕色或棕褐色结晶性粉末
储存条件：-20℃

胶原酶的灭菌首先离心或者用0.8µm的滤器去掉不溶物。然后再用0.2µm的滤器过滤除菌。盐*(代"酸")*甲脒和TLCK联合作用可以与该酶成分中大部分的蛋白酶结合而抑制其活性，但是他们却不会抑制胶原酶的活性。其中盐*(代"酸")*甲脒的浓度一般为1mM，TLCK的浓度一般为0.100～0.135mM。值得 意的是两者不能完全保证所有蛋白酶的活性均被抑制。

胶原酶溶于50 mM TES buffer，pH 7.4 (37℃) 含 0.36 mM *化 *。反应体系的终浓度为50 mM TES，0.36 mM *化*，25 mg 胶原，0.005-0.01 mg 胶原酶。酶液在含有 0.3-0.5 mM *离子的中性pH条件下可以在37℃维持活性15小时。在-20℃可以维持数月。


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SJ0794 剥离硅烷
ARB12525 大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)Elisa分析 Rat nuclear factor-κb p65,nf-κb p65 ELISA KIT
ARB11239 人毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)elisa检测操作说明书 Human muscarinic acetylcholine receptor,m-achr ELISA KIT
*并芘 FMOC-S-trityl-L-cysteine 50-32-8
ARB12908 小鼠白介素23(IL-23)免费代测 Mouse interleukin 23,IL-23 ELISA KIT
DP209 琼脂糖凝胶回收试剂盒
DNA Marker（500-7000bp） 100次
1404-93-9 Vancomycin 盐*(代"酸")万古霉素
C0901 鸡血清(无菌过滤)
缬沙坦 Arbutin 137862-53-4
Warthin-Starry银染色液   2×50ml
001001 新生牛血清 100ml|500ml
乙酰*基丙二酸二乙酯 3-Hydroxybenzoic acid 1068-90-2
2,1,3-*并噻二唑 DEP 273-13-2
PC4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐热反转录酶)
N-乙酰-D-色*酸 Collagenase 2280-01-5
PY04-089  头孢菌素*  2mg/支×10支  每支添加于100ml Bolton肉汤基础中，用于弯曲杆菌的增菌培养
ARB12357 大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)elisa检测操作说明书 Rat cyclic guanosine monophosphate,cgmp ELISA KIT
BTN130567 β-Tubulin小鼠单抗 β-Tubulin Mouse Mab
*检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝微板法)   100T
3150-24-1 对硝基*(代"*")-β-D-吡喃半乳糖苷 PNPG
对硝基*(代"*")基-β-D-吡喃葡糖醛酸苷 2-Nitrobenzoic acid 10344-94-2
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·烟酰胺
编号：QN0115
英文名称：Nicotinamide
规格：25g

别名：烟*(代"碱")酰胺;尼克酰胺
CAS号：98-92-0
分子式：C6H6N2O
分子量：122.12
储存条件：RT
性状：白色针状结晶或粉末

·冰冻切片抗原修复液
编号：QN1257
英文名称：Antigen Retrieval Solution,1×(for Frozen Sections)
规格：100mL|500mL
冰冻切片抗原修复液是一种特别适合用于冰冻切片的快速抗原修复液，只需室温孵育 5 分钟即可完成对冰冻切片样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

使用说明：
1、将冰冻切片用 PBS 洗涤 3 次，每次 5min。
2、将切片浸泡在抗原修复液中，室温孵育 5min。
3、PBS 洗涤样本切片，重复 3 次，每次 5min。充分洗涤残留的 SDS，以免造成抗体失去活性。
4、封闭液封闭切片。
5、随后即可进行一抗孵育等后续的免疫染色步骤。

储存条件：室温，有效期1年

·鸟嘌呤
编号：QN0551
英文名称：Guanosine
规格：5g
CAS号：73-40-5
分子式：C5H5N5O
分子量：151.13
性状：白色正方形结晶或无定型粉末

·葡聚糖T-70
编号：QN0150
英文名称：Dextran T- 70
规格：10g
分子量：70000
储存条件：RT

·低密度脂蛋白
编号：QN0297
英文名称：Low density lipoprotein，human
规格：2mg
分子量：70000
储存条件：RT

·DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)
编号：QN1159
英文名称：Western Blotting Mouse/Rabbit IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗小鼠/兔IgG酶标二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

储存条件：-20℃避光，有效期一年。

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