资源名称 小鼠Th2型T淋巴细胞形态 类型:悬浮 分离基物小鼠。T淋巴细胞;AKR/J 模式菌株:未知 培养方法 传代方法:Protocol: Cultures can be maintained by the addition of fresh medium or replacement of medium. Alternatively, cultures can be established by centrifugation with subsequent resuspension at 1 X 10(5) viable cells/ml. Do not allow the cell density to exceed 3 X 10(6) cells/ml. Interval: Maintain cultures at a cell concentraion between between 1 X 10(5) and 1 X 10(6) viable cells/ml. Medium renewal: Add fresh medium every 2 to 3 days (depending on cell density) 生长条件:Complete growth medium: 1640,90%;FBS,10%;双抗。 Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% 存储条件:Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8% Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase 细胞处理方法: 以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理,如需要更详细技术指导,请及时电话或邮件联系。 一.贴壁细胞 客户接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。 显微镜观察细胞,当细胞融汇至80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。 用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。 1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2 培养。