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- Abmole
- M7528
- 美国
- 2025年10月01日
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- 库存：
大量现货
- 英文名：
Cocktail
- 保质期：
2年
- 供应商：
朗智（上海）生物科技有限公司
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
1ml
产品优势：
组分清晰：8 种抑制剂按照固定浓度配比，分独立两支包装，组分之间互不影响。
稳定高效：防止蛋白质被磷酸化，保留重要蛋白质的完整性，产出率较高。
物美价廉：质量保障同时，价格合理，为您节省研究开支。
实验数据：
产品描述：
本产品是由8 种独立的蛋白酶抑制剂（不含EDTA） 按照优化的配比配置而成的蛋白酶抑制剂混合物。分为A、B 两管：A 管中是磷酸根类似物，以阻止研究中蛋白和脂类的磷酸化状态丢失；B 管则是新兴的天然产物，为磷酸酶提供更加全面的保护。
使用方法：
1. 本产品适用于保护哺乳动物细胞及组织中磷酸酶的稳定性。可用于蛋白免疫印迹（Western Blot）, 免疫共沉淀(Co-IP),免疫荧光（IF） ,免疫组织化学（IHC）,激酶测定（kinase assay）和抗体、酶诊断试剂盒（Dignose Kit）等实验。
2. 实验时，按照1:100 的容积比，将本品预先加入在已准备好的实验体系中，先加A 管，混匀；再加B 管，再次混匀。
保存条件：
本产品应于-20℃环境下密封保存，产品有效期为2 年。使用时可短时间放置于常温或4℃中，用毕应立即放回-20℃中保存。
注意事项：
1. 本产品不含EDTA, 为100×H2O 和100×DMSO 储存液形式。使用时应调整浓度为1×。
2. 本产品置于-20℃保存时，DMSO 呈现冰晶状态，此属于正常现象，非产品质量问题。若B 管融化时间较长，可在25℃水浴中融化。
3. A.B 两管不可以同时加入，以防止沉淀形成。必须先加A 管，再加B 管。
4. 若想得到较为完整的蛋白，推荐使用Abmole 蛋白酶抑制剂（Protease Inhibotor Cocktail）。
5. 本产品仅供科研使用。
常见问题解答：
1. B 管为什么融化较慢？
回答： 因为B 管溶解在DMSO 中，而它储存在-20℃中会结为冰晶，使用时，为了不影响实验进行，需在25℃中水浴融化。
2. A 管、B 管可以一起使用吗？
回答： 不可以。两支混在一起会形成绿色沉淀，使用时需分开加入，先加A 管，后加B 管。
3. 为什么做Western Blot 时得到的磷酸化和非磷酸化的条带都非常弱？
回答： Phophatase Cocktail 只能保证磷酸化蛋白质不受分解，但是若想保证全蛋白的产出率，推荐使用Abmole 蛋白酶抑制剂Protease Cocktail。
附产品组成：
朗智（上海）生物科技有限公司
http://lzbiotech.com
Tel: +(86)021-54019192
Mobile: +(86) 13564617637（微信同号）
QQ：370323648
Email: songxinwei@lzbiotech.com
地址: 上海市徐汇区中山南二路777弄1号楼2405室
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文献和实验检测蛋白磷酸化一定要加磷酸酶抑制剂！！除此以外还应该加蛋白酶抑制剂。 http://www.millipore.com/techpublications/tech1/mcproto402 Protease Inhibitors · EDTA: 1 mM · PMSF: 1 mM · Aprotinin, leupeptin, pepstatin: 1 µg/ml each Phosphatase Inhibitors ·
，直到全部溶解，用 HCl 调节 PH 值到 7.4； 2.加 10 ml 10% 的 NP-40； 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠，搅拌，直到溶液澄清； 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA，用量筒定容到 100 ml，2～8 ℃ 保存； 5.理论上，蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入（抑蛋白酶肽，亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl；PMSF，Na3VO4，NaF 各 500 μl），但是 PMSF 在水溶液中很不稳定，30 分钟就会降解一半，所以 PMSF 应该
化状态进行有效保护。无数经验和实验证据表明：使用 western blot 检测磷酸化蛋白时，一定要在细胞裂解液中加入蛋白酶抑制剂，还要加入一定量的磷酸酶抑制剂，否则即使出来条带也会很浅，给后继定量分析造成困难。磷酸酶抑制剂可以自己配制，也有商品化的 cocktail 可直接购买。像 erk1/2 的磷酸化有 THR 磷酸化和 tyr 磷酸化，所以要有 ser/thr 磷酸酶抑制剂和 tyr 磷酸酶的抑制剂。一般自己配制略显麻烦，考虑的因素比较多，效果不一定好，很多商品化的 cocktail 操作
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