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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
PMVEC
- ATCC Number:
大鼠肺微血管内皮细胞
- 细胞类型:
贴壁生长
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
BJ-X4228 51
- 英文名:
详见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
资源名称 大鼠肺微血管内皮细胞多少钱
种属:PMVEC
提供形式:T25培养瓶/冻存管
安全等级:2
模式菌株:未知
培养方法
培养基:90%高糖DMEM+10%FBS
生长条件:95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度
生长特性:贴壁生长
存储条件:50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
细胞培养步骤:
一.大鼠肺微血管内皮细胞多少钱培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
人胚胎,皮肤,肌肉;M-22
人胚肾细胞(亚系克隆);FIP293
CA4 Others Human 人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 CHO细胞裂解液 (阳性对照)
豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4 中国仓鼠体细胞,R 1610细胞 IAR20细胞,大鼠肝细胞
HNE2, 人鼻咽癌细胞系
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠成纤维细胞(EGFP标记)
ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM-2 / CD102 人细胞裂解液 (阳性对照)
人间充质干细胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg
FC33细胞,Asp2人胚胎肾细胞转化细胞 小鼠垂体细胞,MPC细胞 人脐动脉内皮细胞
HCCLM3(人高转移肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
hCD133+-CB-c pooled 从脐带血提取的人类CD133+祖细胞(hCD134+-CB),混合来源 100000 大鼠腹脊髓神经元RN-vsc
人胚胎,皮肤,肌肉;M-22
人胚肾细胞(亚系克隆);FIP293
CA4 Others Human 人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 CHO细胞裂解液 (阳性对照)
豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4 中国仓鼠体细胞,R 1610细胞 IAR20细胞,大鼠肝细胞
HNE2, 人鼻咽癌细胞系
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
录亚铂酸钾shēng huà shì jì容量:1克
627酸Barbituric acid
儿价分橙10克
吡虫灵 Imidacloprid 826 1ML 通用试剂
L炳安醋苄酯队本磺醋盐 Lclcninq bqnzyl qstqr 4toluqnqsulfonctq 24/6/6
大鼠肺微血管内皮细胞多少钱棉子糖,英文名或英文缩写:D(+)Raffinose pentahydrate,级别:BR,90%,规格:1克
258607清基;清基三氢化硼钠wo7ium cyanoborohydride;wo7ium borocyanohydride;wo7ium cyanohydridoborate
MINERALOIL,LIGHT,WHITE石蜡油高级无色油状液体RTsigma
钾 Potassium Formate,99% 5902 100G 通用试剂
叔丁基二苯基烷 tertButyl(chloro)diphenylsilane,98% 5811 10G 通用试剂
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文献和实验实验材料: 1. 手术切除的正常肺组织 2. 胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/L EDTA 3. 6孔培养板:用多聚赖氨酸包被 4. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS(pH=7.4),添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 6. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 将肺组织至于无菌的培养皿中用含双抗的1×PBS
体外培养模型已被广泛应用于血脑屏障的研究、脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究、新药筛选、脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究等领域。而大多数体内实验采用大鼠为动物模型,而且大鼠具有较多的细胞生物学研究所需的抗体可用,因此进行大鼠脑微血管内皮细胞的培养具有重要的意义。自从Panula等[2]首次成功培养大鼠脑微血管内皮细胞以来,国内外有关大鼠脑微血管内皮细胞的分离和培养方法已有较多的报道,我们发现国内的方法多以组织匀浆、两次尼龙网过滤分离脑微血管段为主[3,4],也有采用酶消化、梯度离心及尼龙网过滤
本人总结了下大鼠内皮细胞的培养方案 一,消化法。优点:获得的细胞比其他方法纯。缺点:获得细胞比较少。 常见问题及解决方法:1.消化的时间不好控制时,建议大家分两段时间消化,消化30分钟时收取消化液放入一个离心管,30分到45分钟段收集的放入另一离心管,离心后看看第二管是否有杂细胞,若没有就把两管混合用,若有就只用第一管的。2.消化液,我的经验是5份0.2%胶原酶和1份0.125%胰酶。3.若很难消化时,可以磁力搅拌消化。注意消化法时结扎一定要紧! 二,植快法。优点:获得细胞
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