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POLARIC™活细胞荧光变色
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POLARIC™活细胞荧光变色溶剂
新型荧光染料
◆背景
POLARIC是活细胞独特的变色荧光溶剂。POLARIC可根据细胞器微环境的疏水性变化,发射光谱改变显著。
◆特点和优点
● 细胞毒性极低。● 在460-520nm的激发波长可达到最小细胞损伤。● 抗褪色荧光。● 根据细胞器的微环境的疏水性/亲水性,发射光谱改变显著
◆实验流程
1.用3μL乙醇溶解红色染料沉淀,并将染料溶液转移到10mL培养基(染色溶液)中。 染色溶液可在4℃保存2周,避光保存。2.将细胞培养在玻璃底皿(非液晶玻璃)上。3.去除培养皿中的培养基,用PBS冲洗,加入等体积的预热染色溶液。
4.细胞在5%CO2,在37℃条件下孵育2小时10分钟。 染色条件应针对细胞进行优化。
5.染色后用培养基洗涤细胞培养物3次。
6.使用荧光显微镜在Ex 460nm 520nm和Em 520nm 700nm下观察染色的细胞。
◆应用
1、使用案例<HEK293> 根据不同细胞器“着色变化”不同。
2、使用案例<Hela细胞>
3、使用案例<rVAC(大鼠内脏脂肪细胞)> 线粒体:橙色 细胞膜:绿色 内质网:黄色
4、使用案例<大鼠心肌细胞> 可使用不同的颜色染色心肌细胞(橙色)和非心肌细胞。染色后,心肌细胞继续跳动。
染色结果比较
5、使用案例<大鼠骨髓单核细胞>
在大鼠骨髓单核细胞-破骨细胞分化培养过程中,染色观察大鼠骨髓单核细胞向破骨细胞分化的过程。
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