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文献和实验挑战 pH沉淀反应,常受pH值控制,也是非常经典的化学合成反应,应用非常广泛。此类反应通常在反应釜中进行,反应结束后,液体须与生成的沉淀物(通常为混悬物)分离。但如何实现快速分离? 方案 沉淀物生成后,继续保持搅拌状态,对混悬液进行过滤和洗涤。如下图所示的实验装置反应釜+过滤模块即可实现反应、过滤流程化。 通过反应釜底部出料阀,颗粒状的悬浮液和反应溶液均可直接排入至过滤模块,如图示布氏漏斗和抽滤瓶,并借助真空泵抽滤,快速完成分离。 细节 为避免颗粒沉淀,建议在排放反应釜的同时继续
在较早的哺乳动物 RNAi 实验中, siRNAs 是通过化学方法合成的,就像合成引物一样, 是应用起来最方便的一种方法,研究人员几乎不需要做什么工作。但是RNA合成成本高,定制周期长,特别是有特殊需求的RNA序列。由于价格比其他方法高出很多, 而且设计好的 siRNAs 中通常只有大约 25% 的 siRNAs 能高效抑制基因的表达(抑制效率 >80% ), 一个基因通常合成 3—5 对 siRNAs , 这使得化学合成 siRNA 的成本更高 (就是 6 — 10 条
化学合成的siRNA 与生物合成siRNA 相比,有以下优点:►操作简便,研究人员得到合成好的siRNA 后,进行简单的稀释处理即可实验。►转染效率高,相对于分子量较大的DNA 质粒,其转染效率高。►对细胞的或者组织的毒副作用小。►可大规模制备,本公司的合成规模可达到克级 (一次合成量1 - 100 g)。►特别适用于基因靶位点已确定,需要大量siRNA 进行siRNA 动物实验研究。
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