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见瓶身标签
- 保质期:
见瓶身标签
- 英文名:
Formamide, Deionized
- 库存:
999
- 供应商:
香港吉斯恩贝国际贸易有限公司
- CAS号:
75-12-7
- 规格:
100ML/500ML/950ML
| 规格: | 100ML | 产品价格: | ¥347.2 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500ML | 产品价格: | ¥845.6 |
| 规格: | 950ML | 产品价格: | ¥1504.0 |
去离子甲酰胺产品说明书
基本描述:
甲酰胺是一种衍生自甲酸的透明液体酰胺。甲酰胺可让核酸在室温下变性和复性。
基本应用:
甲酰胺适用于使用标准配方配制的杂交缓冲液。甲酰胺可弱化核酸双链体稳定性,通常在需要较低杂交温度的杂交方案中50%浓度使用。其他应用包括:
1、制备用于BrdU免疫组化的小鼠脑切片。
2、HeLa细胞FISH分析。
3、使用变性梯度凝胶电泳法制备用于PCR产物分析的聚丙烯 酰胺凝胶。
4、甲酰胺可使核酸双螺旋不稳定,通常可以 50% 的浓度,用于需要较低杂交温度的杂交实验。
适用性
1、核酸杂交
2、防冻剂和凝胶稳定剂
3、弱化核酸双链体稳定性
4、消除核酸二级结构
5、制备RNA和DNA应用所需的杂交缓冲液
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文献和实验与直接原位PCR所不同的是,靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入,而是标记一段与扩增片段互补的探针,在扩增结束后,应用此探针进行原位杂交。因此,此处主要介绍原位杂交,其余方法同原位PCR。 一、预杂交 1. 试剂与配制 2×SSC 50%去离子甲酰胺:用4×SSC配制(v/v) 预杂交液:2×SSC,5%硫酸葡聚糖,50%甲酰胺,0.2%脱脂奶粉 2. 操作方法 ① 在进行完原位PCR扩增后,用2×SSC预浸经乙醇脱水、空气干燥的玻片,并简洗15min;
试剂: (1)MOPS缓冲液(10*):0.4mol/L 吗啉代丙烷磺酸(MOPS) (Ph7.0),0.1mol/L NaAc, 10mol/L EDTA。 (2)上样染料:50%甘油,1mmol/L EDTA ,0.4%溴酚蓝,0.4%二甲苯蓝。 (3)甲醛。 (4)去离子甲酰胺。v电泳槽清洗:去污剂洗干净(一般浸泡过夜)——水冲洗——乙醇干燥——3%H2O2灌满——室温放置10分钟——0.1%DEPC水冲洗。 操作:
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
放大,因此灵敏度不如间接标记的方法。实验用具及材料相关溶液的配制1)20×SSC:175.3g NaCl,88.2g柠檬酸钠,加水至1000mL(用10mol/L NaOH调pH 至7.0)。2)去离子甲酰胺(DF):将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min,用Whatman l号滤纸滤。3)体积分数70%甲酰胺/2×SSC:35mL甲酰胺,5mL 20×SSC,10mL水。4)体积分数50%甲酰胺/2×SSC:100mL甲酰胺,20mL 20×SSC,80mL水。5)体积
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