人肺腺癌顺铂耐药性细胞说明书

公司供应的细胞仅用于科研实验。
资源名称    人肺腺癌顺铂耐药性细胞说明书
种属:A549/DDP
模式菌株:未知
细胞培养步骤:
一．人肺腺癌顺铂耐药性细胞说明书培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
DL乳酸钠5克2～8℃
(多聚蛋白胨)
二乙基乙酰与米酸酯，英文名或英文缩写：Dietxyl acetamidomalonate，级别：BR，99%，规格：5毫克
2，2二羌基二流代6，6联 6xy7noXY2NcPHTHYL DISULFIDq 6088
聚醇缩1，英文名或英文缩写：PVF，级别：AR，99%，规格：5克
AEC3基N乙基25克AR，98%
33四乙酸二钠etxylenedinitnilotetraacetic acid diwo7ium salt dihydrate
肌酸，英文名或英文缩写：Creatine Monohydrate，级别：BR，99%，规格：25克
1.2 1,2BUTcNqDIOL 28403
三氧化钼 Molybdqnum trioxidq 2
四盐酸精胺shēng huà shì jì容量：5毫克
52水合茚三酮Ninhydrin hydrate
葡萄花醇，英文名或英文缩写：1Heptanol，级别：CP，99%，规格：25克
2甲基三 2Methylbenzotrifluoride,98% 6308 1G 通用试剂
胶回收试剂盒 BR 50T 国产
大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Rattus
兔肾细胞;RK13
小鼠中脑缝神经细胞(脑脊)(MN-r)(1×106)
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1 小鼠成骨细胞完全培养基 100mL
人海马趾星形胶质细胞RNAHA-h miRNA5 μg
EFNA3 Others Mouse 小鼠 EFNA3 / Ephrin-A3 人细胞裂解液 (阳性对照)
人肺腺癌顺铂耐药性细胞说明书胰腺癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml
CD2 Others Canine 狗 CD2 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠纤维母细胞;1/EJ 1-1
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-C 卵巢癌细胞，HO-8910细胞 CHO/dhFr-细胞，中国仓鼠肾细胞(二氢叶酸还原酶缺陷型)
人胚胎膀胱组织来源细胞;CCC-HB-2
MDGA2 Others Mouse 小鼠 MDGA2 / MAMDC1 人细胞裂解液 (阳性对照)
注意事项： 
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们。 
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。 
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。 
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。