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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
MM.1S
- ATCC Number:
人免疫球蛋白lambda骨髓瘤细胞
- 细胞类型:
半贴壁半悬浮生长
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
45
- 英文名:
详见说明书
- 生长状态:
半贴壁半悬浮生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
CM2-1培养液中,半贴壁半悬浮,上皮细胞样,圆形,不规则形
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
公司供应的细胞仅用于科研实验。
资源名称 人免疫球蛋白lambda骨髓瘤细胞说明书
种属:MM.1S
类型:半贴壁半悬浮生长
形态:CM2-1培养液中,半贴壁半悬浮,上皮细胞样,圆形,不规则形
分离基物:该细胞源于患有多发性骨髓瘤的黑人女性患者, CD25+, CD38+, CD52+, CD59+,表达糖皮质激素受体(GR),分泌IgGλ轻链,对地塞米松敏感。
提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式菌株:未知
培养方法
传代方法:将培养液(含悬浮细胞)吸至离心管中,(110g,3min)离心,收集细胞;皿中细胞用PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。①传代:将以上皿细胞用10mL CM2-1培养液终止消化,离心管细胞用2mLCM2-1培养液重悬,共计12mL培养液一并吸至皿里混匀,分3~6皿培养
生长条件:37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养基,含谷氨酰胺。
生长特性:生长速度慢,刚复苏后是悬浮生长,过段时间后会出现轻微贴壁现象
存储条件:冻存:用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,后吸出与离心管细胞混匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
细胞培养步骤:
一.人免疫球蛋白lambda骨髓瘤细胞说明书培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
Oxalaceticacid草酰乙酸5克BR
102乙基2etxylhexan1ol;2etxylhexyl alcohol
wo7iumACETATE,ANxy7noUS钠,无水ACS级,美国药典级,食品化学法典级白色结晶RTsigma
队三拂氧基本异青醋酯 4(TrifluoroMqthoxy)phqnyl isocycnctq 320371
改良LETHEEN琼脂基础25毫升2~8℃
BOCD天冬酰胺shēng huà shì jì容量:RT10克
887邻磺酰胺otoluesulfonaMide
2Amino5,6dixy7no4Hcyclopenta[b]thiopxene3carboxylic acid 409
乙酯 ,≥99% 100G 通用试剂
LMINEL甲(蛋酸)美国药典级白色至米白色粉末COLDsigma
四乙酰核糖,英文名或英文缩写:1,2,3,5TetraOacetylβDribofuranose,级别:,98%,规格:10毫升
LThreonine 5g Sigma分装
DDM月桂酰基麦芽糖苷500毫克高,98%
甜菜减言醋盐 Bqtcinq xy7nochloridq;Lycinq xy7nochloridq;Oxynqurinq xy7nochloridq;TriMqthyl glycocoll xy7nochloridq;1CcrboxyN,N,NtriMqthylMqthcncMiniuM chloridq; 2
甲基绿 Methyl Green (Dye content, ≥%) 36 1G 染色剂
mCF, 小鼠心脏成纤维细胞 Mouse
非洲绿猴肾细胞(SV40转化);COS-1 [COS1]
大鼠小脑星形胶质细胞(RAc)(5×105)
KM小鼠子瘤株;U27 小鼠前列腺上皮细胞完全培养基 100mL
人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1
CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200Rla 人细胞裂解液 (阳性对照)
人免疫球蛋白lambda骨髓瘤细胞说明书原代表皮角化细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO细胞裂解液 (阳性对照)
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9801
豹猫肺成纤维样细胞;LCL1 张氏肝细胞,HeLa[Chang Liver]细胞 LLC-PK1细胞,猪肾细胞
人肺成纤维细胞;HFL1
HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
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文献和实验(二)杂交瘤细胞的选择 经HAT选择培养基培养10~14天,未经融合的骨髓瘤细胞相继死去,而杂交瘤细胞即可逐渐长成细胞集落。停用HAT液后,改用HT培养基。当细胞集落面积超过培养孔的1/10以上时,即可用敏感的免疫学方法检测出阳性孔。连续三次检测逐渐升高或维持在同一水平者,则可以做克隆化,一部分则冷藏起来做长期保种用。
瘤来源的动物是相同品系,例如使用SP2/0骨髓瘤细胞时应该选用Balb/C小鼠,同时必须使用品系纯正的小鼠。 (2)培养基中加入了过高浓度的HAT,或者仅A的浓度过高或HT的浓度过低,建议用纯的骨髓瘤和已有的杂交瘤作HAT浓度筛选。 (3)培养基不正确或血清浓度不正确或使用了劣质血清。 (4)未正确制备饲养层细胞。参见本站有关饲养层细胞制备的部份。 (5)接种杂交瘤细胞的培养板过多。一般在5-20块96孔板为宜。 (6)融合后,未及时转移或稀释
等。抗原的反应性取决于抗原决定簇(antigenic determinant),或称为表位(epitope)。一个抗原分子可带有不同的决定簇。1.2 抗体1.2.1 抗体的结构抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原
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