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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
SK-MEL-1
- ATCC Number:
人皮肤黑色素瘤细胞
- 细胞类型:
半悬浮生长,大部分是悬浮生长
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
35
- 英文名:
详见说明书
- 生长状态:
半悬浮生长,大部分是悬浮生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
悬浮:圆形,抱团生长,贴壁:梭形,两端是细长的触角
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
资源名称 人皮肤黑色素瘤细胞说明书
种属:SK-MEL-1
类型:半悬浮生长,大部分是悬浮生长
形态:悬浮:圆形,抱团生长,贴壁:梭形,两端是细长的触角
分离基物:该细胞由OettgenF及其同事从一名29岁的患有广泛、快速进展性恶性黑色素瘤的白人男性患者的胸导管中分离建立的。
提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式菌株:未知
应用领域:该细胞可产生黑色素,电镜检测发现细胞中色素颗粒与自身合成和吞噬作用相关。在63%的恶性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者体内发现了针对该细胞系的抗体。
培养方法
传代方法:将培养液(含悬浮细胞)吸至离心管中,(110g,3min)离心,收集细胞;皿中细胞用PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。①传代:将以上皿细胞用10mL CM2-1培养液终止消化,离心管细胞用2mLCM2-1培养液重悬,共计12mL培养液一并吸至皿里混匀,分3~6皿培养;
生长条件:37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养基,含谷氨酰胺。
存储条件:②冻存:用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,后吸出与离心管细胞混匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
细胞培养步骤:
一.人皮肤黑色素瘤细胞说明书培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
GABA4基25克BR,99%
870铋BisMuth sulfate;BisMuthous sulfate
LBBROTH,MILLER(LURIABERTANI)LB肉汤组织培养级米白色至棕褐色粉末RTsigma
3异丁基1基皇嘌呤(20℃) 3ISOBUTYL1MqTHYLXcNTHINq 88284
ADENOSINEFREEBASE腺苷高级白色晶体或结晶粉末COLDsigma
BROMOCRESOLGREENwo7iumSALT绿钠盐ACS级深棕色至暗红色或绿色结晶粉末RTsigma
108009N,N’二甲基2Dimetxylaminoetxylamine
乳清酸25克
6甲基 6Methyl,≥98% 23 5G 通用试剂
炔 Ciclopirox olamine,98% 207 1G 通用试剂
钽粒shēng huà shì jì容量:25克
乙基罗丹明B;乙基玫瑰红B;若丹明B乙酯etxylrhodaMine B;
玉米素shēng huà shì jì容量:25克
25乙酰基 2Bromo5Acetylpyridine,97% 905 1G 通用试剂
果胶酶/粘胶质酶/果胶甲脂酶/聚半乳糖醛酸酶/Pectinase BR,500u/mg 25克 国产/进口
LM-8 小鼠骨肉瘤
CL-0295MV3(人黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人气管上皮细胞(HTEpiC)(5×105 )
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2B 大鼠皮下脂肪细胞完全培养基 100mL
人葡萄膜黑色素细胞;UM
WFDC2 Others Human 人 WFDC2 / HE4 / WAP5 人细胞裂解液 (阳性对照)
人皮肤黑色素瘤细胞说明书中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2
IL1R2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 人细胞裂解液 (阳性对照)
滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
T2细胞,转HLA-2基因B细胞 小鼠癌细胞,MA891细胞 人神经元cDNAHN cDNA
NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CNE(人鼻咽癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0134KU812(人外周血嗜碱性白血病细胞)5×106cells/瓶×2 杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7
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