真菌毒素免疫亲和柱

乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的检测方案

近日，蒙牛纯牛奶被检测出强致癌物——黄曲霉毒素M1，消息一出顿时又掀起一股食品安全隐患的讨论。相比之前的三聚氰胺，黄曲霉素是否更难检测？ 现整理出全套的专业检测方案，让乳和乳制品中黄曲霉毒素M1无处躲藏。 1. 试用范围 牛奶，奶粉，发酵乳，干酪，奶油等乳制品 2. 方法原理 黄曲霉毒素M1易溶于极性溶剂，因此均匀基质中的黄曲霉毒素M1可以通过甲醇/水震荡分散提取，对于高脂肪/油含量的样品基质加入正己烷予以脱脂。本方法采用免疫亲和柱净化，荧光检测器测定乳制品中黄

多克隆抗体和单克隆抗体的比较

免疫亲和层析技术使用单克隆抗体或经过亲和层析纯化的多克隆抗体。在某些情况下，可用未纯化的多克隆抗体，但一般不使用混合的单克隆抗体。 1. 应用多克隆抗体进行免疫亲和层析 使用多克隆抗体进行免疫亲和层析有一定的局限性，因为多克隆抗体通常结合抗原分子上的多个表位，虽然亲合力高，但洗脱困难。当一种抗原与多种不同的抗体结合后，需要很苛刻的洗脱条件，通常会损坏抗体层析柱，至少也会使部分抗原变性。在这种情况下，每种抗原和抗体相互作用的洗脱条件不同，故难以建立有效的洗脱条件。应用多克

从免疫亲和层析柱上洗脱抗原类型

实际上，从免疫亲和层析柱上洗脱抗原的操作比较简单，而且也比较迅速。主要工作是设计和摸索各种有效的洗脱条件。可以采用三种类型的方法进行洗脱，使抗原抗体复合物解离：①使用较苛刻的条件；②加入模拟结合位点的饱和量小分子化合物，和/或③使用一种能引起构象改变而使抗原释放的试剂。 最常用的洗脱方法是基于破坏抗体与抗原之间的结合键。洗脱条件可以较为强烈，使抗体和抗原变性，或比较温和，使抗原和抗体仍保持原来活性。 采用相对强烈的洗脱条件应根据亲和层析柱所用抗体而定。如果使用的是亲和