线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10)规格

操作步骤(仅供参考)：
1、线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10)规格
英文名称：Mitochondrial Membrane Potential Kit(JC-10 Assay)
产品规格：100T
发货周期：1～3天
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10)是一种以JC-10为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-10是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-10聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时，JC-10不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-10为单体，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-10单体的最大激发波长为515nm，最大发射波长为529nm;JC-10聚合物的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品;对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
储存条件-20℃避光，避免反复冻融，有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 薄荷, mixture of isomersBCIP/NBT Substrate solution
 3,5-二溴-4-唑BCIP/INT Substrate solution
 4-邻二酰亚对兰/对蓝/5-溴-4--3-吲哚酯/5-溴-4--3-吲哚盐/BCIP
 3-溴邻酯对兰盐/对蓝盐/5-溴-4--3-吲哚酯盐/BCIP， 2Na
 1-茜素络合指示剂/茜素羧络合剂/试剂/3-茜素-N，N-二/茜素络合剂/3-茜素二/茜素蓝/茜素兰/Alizarin complexon
 MDA 19蓝/兰/Toluidine bule
 4-溴-1,1,2-三-1-烯蓝O/兰O/3--7-(二)-2-吩噻嗪-5-翁化物/性蓝17/Toluidine blue O
 尿刊蓝（水溶）/兰水溶/性蓝22/水溶蓝/可溶性蓝/中国蓝/青瓷色/Aniline blue water soluble
 5-氧吲哚虎红/玫瑰红/四四荧光素/孟加拉红/孟加拉玫瑰红B/性红94/Rose Bengal
 5--1H-吲哚-2-羧酯刚果红试纸/Congo red test paper
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10)规格Vamidothion蚜灭多2275232
2(Methylthio)pyrazineNBOC间21948709
D(+)XyloseD木糖58866
Diethyl ethoxymethylenemalonate叉二二87138
3Butyn1ol3炔1927742
2Chloro3methylthiophene2314345972
LEUROSINE环长春23360921
ASTRAGALOSIDE黄芪总皂甙17429695
alphaAngelica lactone当归内591128
Dulcitol甜608662
1,3,5Trifluorobenzene1,3,5三372383
1Methylcyclopentene环693890
Methyl naphthalene1acetate12876780
2(TRIFLUOROMETHYL)BENZYLAMINE2(三)419308
2Butanone oxime肟96297
哥伦比亚琼脂对照培养  订购|咨询  规格 13.2g/300ml
茵陈(滨蒿)  订购|咨询  规格 1.5g
地芬多 3254895 订购|咨询  规格 100mg
党参  订购|咨询  规格 0.5g
米力农  订购|咨询  规格 100mg
凝血酶（牛血）  订购|咨询  规格 150BP 单位/支
榧子  订购|咨询  规格 3g
长梗冬青苷  订购|咨询  规格 20mg
对杨  订购|咨询  规格 100mg
连翘苷B  订购|咨询  规格 20mg
木通苷B（荷苞花苷B）  订购|咨询  规格 20mg/支
糠 88142 订购|咨询  规格 20mg
亚蓝  订购|咨询  规格 250mg
前列腺素B1  订购|咨询  规格 见标示量
地瓜藤  订购|咨询  规格 1g