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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
25
- 英文名：
Cell Counting Kit (CCK-8)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100T
英文名称：Cell Counting Kit (CCK-8)
产品规格：100T
发货周期：1～3天
CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
CellCountingKit简称CCK试剂盒，是一种基于WST-8（化学名2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8属于MTT的升级产品，工作原理为在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。
储存条件4℃，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：1．CCK-8试剂盒说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
3,4-二代酰马来酸罗格列/5-4-2-N-基-N-(2-啶基)基-氧基苄基噻唑-2,4二马来酸盐/Rosiglitazone maleate
烯基二茂铁嘧啶/N-2-嘧啶基-4-酰/SD-Na
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酰基二茂铁尼考/洛芬/砜霉素/Florfenicol
5-(2-溴基)-2,3-二并恩诺沙星/蒽诺沙星/达力新/1-环基-7-（4-基-1-嗪基）-6--1，4-二-4-氧代-3-羧酸/Enrofloxacin
2-基-5-酸诺沙星/呱酸/酸/1-基-6--1，4-二-4-氧代-7-（1-嗪基）-3-羧酸/Norfloxacin
邻-4-酸井冈霉素/有效霉素/N-（1S）-（1,4,6/5）-3-羟基-4,5,6-三羟基-2-环已烯基O-β-D-喃葡萄糖基-（1→3）1S-（1,2,4/3,5）-2,3,4-三羟基-5-羟基环已基/Validamycin
5-(2-)异恶唑-3-酸腐草霉素/Phleomycin from Streptomyces verticillus
4-叔基醇(顺反混合)巴龙霉素/Paromomycin sulfate salt
CCK-8试剂盒说明书戈舍瑞林杂质标准品 规格2mg
戈舍瑞林环境标准品 规格1．0mg
格拉司琼相关物质E标准品 规格15mg
葡萄籽低聚原花青素标准品 规格500mg
香胶树提取物标准品 规格500mg Purified Guggul Extract
肝素标准品(系统适应用) 规格50mg
天仙子相关物质A标准品 规格10mg
门冬胰岛素标准品(28℃) 规格ea
克沙相关物质C标准品 规格25mg
帕相关物质B标准品 规格100mg
溶菌酶物 进口、国产 Lysozymechloride 含量高，110000
溶葡萄球菌酶 进口、国产 Lysostaphin 含量高，115000
鞣 进口、国产 Tannicacid 含量CP，98%
鞣酶 进口、国产 Tannase 含量高，98%
肉豆蔻 进口、国产 Tetradecanol 含量BR，95%
肉豆蔻基三基铵 进口、国产 TTAC 含量颗粒
肉毒 进口、国产 VBT 含量IND
白蛋白 进口、国产 αLactalbumin 含量BR，50u/mg
低铁 进口、国产 Ferrouslactate 含量BR，90%
过物酶 进口、国产 Lactoperoxidasefrombovinemilk 含量0.2OD/eachprimer
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人胆囊收缩素 ( CCK-8 )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 CCK-8 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 CCK-8与单抗结合，加入生物素化的抗人 CCK-8
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上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人Salusin - a ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 Salusin- a 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Salusin- a 与单抗结合，加入生物
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