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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
37
- 英文名：
Camptothecin (5mM)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
400μl
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：喜树碱溶液(5mM)说明书
英文名称：Camptothecin (5mM)
产品规格：400μl
发货周期：1～3天
喜树碱（Camptothecin，CPT），从Camptothecaacuminata（Camptotheca，喜树）的树皮和树干中分离到的一种类生物碱，呈现出抗白血病和肿瘤特性。喜树碱是一种有效的拓扑异构酶I（TopoisomeraseI,TopoI）抑制剂，不可逆结合DNA-TopoI复合物，抑制TopoI切割后DNA的重新结合，并且以共价连接DNA的方式固定化酶。该酶复合物随后发生泛素化并被26S蛋白酶体破坏，最终将胞内拓扑异构酶消耗殆尽。低浓度的喜树碱可停滞细胞周期在S期，并以细胞周期依赖或者非依赖的方式诱导大量正常或癌变细胞发生凋亡。
喜树碱常被用来诱导并建立细胞凋亡模型，其在体外按照剂量依赖的表现诱导凋亡发生。本品以溶于DMSO的母液形式提供，浓度为5mM，只需加入细胞培养液稀释到需要的工作浓度即可，操作简单方便。
英文别名(+)-camptothecin;(S)-camptothecin;21,22-Secocamptothecin-21-oicacid;lactone20(S)-camptothecin;(S)-(+)-camptothecin;NSC100880;
CAS7689-03-4
分子式C20H16N2O4
分子量348.36
纯度>98%
储存条件-20℃，有效期一年
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
喜树碱溶液(5mM)说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
酰唑草0.5ml离心管盒
盐酸伊托必利0.2ml离心管盒
酸对氧苄酯50ml离心管
对二氧精酸琼脂糖凝胶4B/Arginine Sepharose 4B
氧基亚基二腈GST琼脂糖凝胶4B/谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B/Glutathione Sepharose 4B
壬酸酯明胶琼脂糖凝胶4B/Gelatin Sepharose 4B
2-溴-7-芴葡聚糖凝胶LH-60/Sephadex LH-60
萘1,3,6-三酸三盐水合物葡聚糖凝胶LH-20/Sephadex LH-20
己二酸二辛酯环氧琼脂糖凝胶6B/Epoxy-activated Sepharose 6B
2-庚NHS活化琼脂糖凝胶4FF/NHS活化羧基琼脂糖凝胶4FF
喜树碱溶液(5mM)说明书二类残留溶剂标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂二标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂N,N二基酰标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂1,4二恶标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂二标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂酰标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂己标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂标准品 规格1.2ml×3ampules
二类残留溶剂标准品 规格1.2ml×3ampules
十二酯 进口、国产 Methyllaurate 含量GR，99.99%
十二 进口、国产 Lauricacid 含量高，98%
十二 进口、国产 Sodiumdodecanoate 含量超，99%
十二酯 进口、国产 Ethyllaurate 含量99%
十二基βD葡萄糖苷 进口、国产 Laurylmonoglucoside 含量BR，98%
十二基6 进口、国产 Sodiumdodecylbenzenesulfonate 含量FMP
十二基二基苄基铵 进口、国产 Benzyldodecyldimethylammoniumbromide 含量激光级，95%
十二基基二基铵 进口、国产 EDDAB 含量BS
十二钨水合物 进口、国产 Sodiumphosphotungstate 含量CP，98%
十六基基 进口、国产 Hexadecylpyridiniumbromide 含量AR
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验mm，外径约为12.5mm，外壁长度约为114mm。 3．光源的光谱能量分布与CIE光源C相近似，其光 线横向透过工作标准及试样。 4．周围环境呈中性色，两个工作标准与一个试样同处于视野之内。 三、测量原理 仪器的电路部分为一带缓起动的高精度直流稳压电源来为光源提供稳定的电压，以确保光源的发射光谱特性及灯泡寿命。根据国际标准ISO4630规定，其光源应为CIE所推荐的C光源。为此本仪器采用了玻璃滤光器对光源的发射光谱特性进行了修正。 即：Sc（λ）=SA（λ）·τ（λ） 式中：Sc
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