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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°冻存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Sulfo-EMCS
- 库存:
1000
- 供应商:
魅罗科技有限公司(MELOPEG)
- CAS号:
215312-86-0
N-[e-maleimidocaproyloxy]sulfosuccinimide ester
产品结构

产品信息
•英文简称:Sulfo-EMCS (N-[e-maleimidocaproyloxy]sulfosuccinimide ester),
•中文名称:e-马来酰亚胺己酸磺基琥珀酰亚胺酯
• 分子式:C14H15N2NaO9S
• 分子量:410.33
• CAS号: 215312-86-0
• 间隔臂:9.4Å
• 溶剂:水
• 反应性基团:sulfo NHS, Mal
• 对以下分子有反应性:NH2, SH
存储条件
-20℃以下冰冻。
注意事项
•EMCS和Sulfo-EMCS交联剂对水分敏感。将试剂瓶在指定温度下保存在干燥剂中。打开之前,请将样品瓶平衡至室温,以防止水分在容器内凝结。溶解所需量的试剂,并在水解发生之前立即使用。丢弃任何未使用的重构试剂。请勿尝试制作和存储库存解决方案。
•在偶联过程中避免使用含有伯胺(例如Tris或甘氨酸)和巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐到适当的缓冲液中,例如磷酸盐缓冲液(PBS)。
•与马来酰亚胺部分反应的分子必须具有游离的(还原的)巯基。用固定的TCEP二硫化物还原凝胶还原肽二硫键。在室温下使用5 mM TCEP(1:100 TCEP溶液)还原高分子量蛋白质中的二硫键,持续30分钟,然后两次通过适当的脱盐柱。请注意,蛋白质(例如抗体)可能会因其所含的二硫键完全还原而失活。可用2-巯基乙胺·HCl(2-MEA)完成IgG中铰链区二硫键的选择性还原。可以使用N-琥珀酰亚胺S-乙酰硫基乙酸酯(SATA,)或2-亚氨基硫杂环wu烷•HCl(Traut试剂),可修饰伯胺。
产品应用
魅罗科技(MeloPEG)EMCS及其水溶性类似物Sulfo-EMCS是杂双功能交联剂,其中包含N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯和马来酰亚胺基团,允许共价键合含胺和巯基的分子。
NHS与伯胺在pH 7-9下反应形成酰胺键,而马来酰亚胺与巯基在pH 6.5-7.5下反应形成稳定的硫醚键。在水溶液中,NHS酯的水解降解是竞争性反应,其速率随pH值增加。马来酰亚胺基团比NHS-酯基团更稳定,但会缓慢水解,并且在pH值> 7.5时也会失去其对巯基的反应特异性。由于这些原因,涉及这些交联剂的缀合实验通常在pH 7.2-7.5下进行,在马来酰亚胺(巯基靶向)反应之前或同时完成NHS-酯(胺靶向)反应。
EMCS和Sulfo-EMCS通常用于两步反应方案中,以制备抗体-酶和半抗原-载体蛋白结合物。首先,使含胺蛋白与摩尔倍数过量的交联剂反应,然后通过脱盐或透析去除过量的(未反应的)试剂;最后,加入含巯基的分子与已经连接到第一个蛋白质上的马来酰亚胺基团反应。
Sulfo-EMCS可溶于水和许多其他水性缓冲液,至约10 mM,尽管溶解度随盐浓度的增加而降低。 EMCS不是直接水溶性的,必须首先溶解在有机溶剂中,例如二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF);通常可以随后稀释到含水反应缓冲液中,如果有机溶剂的最终浓度小于10%,则大多数蛋白质反应物将保持可溶.
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