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- 2026年02月13日
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艾柏森（北京）生物科技有限公司
蛋白质印迹法（Western Blot）通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的分子生物学技术。
采用胺凝胶电泳进行蛋白质样品的分离，随后将蛋白转移到硝酸纤维素薄膜上进行固定。固定的目的蛋白即为抗原，因此加入适量的对应抗体进行免疫反应，能与抗体紧密结合的抗原及为目的蛋白。而后加入有标记的二抗或酶，因此结合的抗原-抗体可被检测到。
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文献和实验llh刘丽华 请教高手我最近做western blot，结果总是不理想，目的条带总是很淡，上样量已经是60ug了，封闭用的是5%脱脂奶粉，我还应该怎么改进哦？下面是我的结果，采用的是ECL化学发光，凝胶成像系统拍照，下面一条是我的目的条带。 麻烦各位帮帮忙吧！ Mostino 转膜应充分，并提高第一抗体的使用量！ 成其瑞 用好点的抗体 volano
anlise 刚做的western，跑分离胶时发现mark的条带被拖长了，原来的线性条带变成了长方形。 考虑哪些方面的原因呢？ selleckchemcials 1. 可能是电流太强了， 可以考虑把电压调低一点~ 2. 分离胶浓度有点低，可以考虑把换成高浓度的胶~ 做实验的时候，为了得到漂亮的图，一定不要介意多花时间~我有的时候为了让条带好看，170KD的蛋白都用12%的胶，跑上3小时呢~
zhuhuachao 请问各位战友， western-blot法测得的结果是你所要检测蛋白的总蛋白还是只包括游离的蛋白？或者说该目标蛋白与其他蛋白结合以后，western-blot法结果上是否有所反应？ amygdala 一般来说，western blot检测到的是包括游离态和聚合态的总蛋白，目标蛋白与其他蛋白结合的情况下也能检测出来。能否检测取决于抗体的识别位点是否存在，通常情况下目标蛋白的抗体识别位点不会受其形成复合物影响
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