- ¥1680
- 上海雅吉
- 180703
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海雅吉生物科技有限公司
- 规格：
50T
1. 防污染,在 2×可视化 LAMP MagicMix 中整合了 dUTP-UNG 防污染系统，
解决了 LAMP 扩增非常容易污染的这个棘手问题。
2. 可视化，整合了本公司的 A 型 LAMP 可见光染料，不需要任何仪器即可肉
眼判断是否有扩增。
3. 使用改良的 Bst DNA 聚合酶，使本产品既可用 DNA 为模板于 LAMP 扩增，
也可用 RNA 模板进行 UT-LAMP 扩增。DNA 聚合酶只有在 40℃以上时扩
增才启动，反应特异性更强。
4. 扩增效率更高，扩增效率可达到上亿倍，比 PCR 灵敏一个数量级，可检测
到单拷贝的 DNA 分子。
5. 本试剂盒足够 50 次 20uL 体系的可视化 UNG-LAMP 和 UNG-RT-LAMP
扩增。
6. 本试剂只能用于科研，不能用于临床。
规格及成分 成 份 编 号 塑料袋包装
2×可视化 UNG-LAMP MagicMix 180703a 500 uL
使用手册 180703sc 1 份
运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 LAMP 模板、RT-LAMP 模板及 LAMP 引物
使用方法 1. 配制自备的5×LAMP引物混合液：先加超纯水（不要用TE）将各引物干粉
稀释到下表所列母液浓度，然后在一新的离心管中按表中所列加入量加入各
种引物母液和自备超纯水，最后得到1mL的5×LAMP引物混合液。如果不
使用Loop引物，其体积由水填充如果需要配制的5×LAMP引物混合液体积
大于或小于1mL，则各成分的用量请按比例调整。此混合液可以在-20℃放
置2年。
引物名称 母液浓度 加入量 在混合液中终于浓度
FIP 引物 100 uM 80 uL 8 uM
BIP 引物 100 uM 80 uL 8 uM
F3 引物 100 uM 10 uL 1 uM
B3 引物 100 uM 10 uL 1 uM
Loop F 100 uM 20 uL 2 uM
Loop B 100 uM 20 uL 2 uM
自备超纯水 780 uL
2. 在新的反应管中设置UNG-LAMP或UNG-RT-LAMP反应：
成份 样品管 阴性对照 1 阴性对照 2
2×可视化 UNG-LAMP Mix 10 uL 10 uL 10 uL
自备 5×LAMP 引物混合液 4 uL 4 uL -
自备模板 DNA 或 RNA 1-100ng - 1-100ng
补超纯水到 20 uL 20 uL 20 uL
3. 混匀，此时反应液呈现非常浅的绿色，由于是否有反应是跟阴性对照和反应
前对比，所以一定要设置阴性对照，并且反应前要手机照相留存以供反应后
比对。
4. 置于25℃5分钟（让UNG灭活可能的LAMP的污染），然后放63℃扩增
60-120分钟（如果不使用Loop引物，则最好保温2小时）。如果是在PCR
仪中保温，必须加热盖。如果用金属浴保温，没有热盖，必须在孔中加水以
填充孔和管子间的空隙，并且在管中加50uL石蜡油，否则保温期间反应体
系的水分会蒸发，影响反应效率）。
5. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶和UNG酶。
6. 如果有阳性扩增，则反应液将变成绿色，如果没有阳性扩增，反应液将还是
浅绿色。标准的反应结果如下图（左边1个为阴性，右边2个为阳性）：
7. 如果需要电泳确认，则取扩增产物5 uL直接在2%的琼脂糖凝胶电泳（不需
要再加上样液），可见LAMP特征性电泳图谱。一般不简易在开盖，这正式
产生污染的原因。
注意事项
1. 引物设计对 LAMP 成功扩增十分关键，尽量以保守区设计引物。
2. 引物至少包括 F3/B3 和 FIP/BIP，加入环状引物 F loop/B loop 可
以使反应速度大大提高。
3. 应优化引物序列、GC 含量和尽量避免二级结构。
4. 要确证扩增的为目标基因，可以选择有特定的限制性酶切位点的靶分子
或者在引物中的连接区加上限制性内切酶的识别位点，扩增结束后再用
此其对应的限制性内切酶去酶切。如果能切开，则很可能是所选的靶分
子。如果不能，则可能是非特异扩增或引物自扩。
关联产品 Bst DNA 聚合酶(CAT#:100209)
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文献和实验释放酶活；一类是抗体法修饰的热启动酶，如 Champagne Taq ，预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间，方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢？如果实验对保真度的需求不高，那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍，可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段，对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注，短短几年，该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中，在这次甲型H1N1流感事件中，日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广，LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中，并得到了欧美国家的认同。LAMP方法的优势除了高特异性、高灵敏度外，操作十分简单，对仪器设备要求低，一台水浴锅或恒温箱就能实现反应，结果的检测也很简单，不需要像PCR
，Addgene.org 上面就有：国内很多厂家为了卖试剂盒，也录制了很多高质量的视频供大家学习，比如天根的可视化操作网站。最后提一句，别忘了我们还有优酷，比如我想学习一下细胞培养的基本操作，简单一搜，应有尽有：而且优酷还有播单，里面有其他热心网友为你整理的合集，推荐看看 Gibco 的细胞操作视频，对于养细胞入门非常有帮助。视频资源可以帮助你快速获得对整个实验的大体了解，比天天守在实验室看别人做实验要快很多。等到对实验有了大体了解，就可以开始订购所需试剂，这是另一个重要的学习途径。在订购的过程中你会有很多
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