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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
60
- 英文名:
D1 ORL UVA [D1]
- 规格:
详见说明书
种属:D1 ORL UVA [D1]
类型:贴壁
形态:CM1-1培养液中,贴壁,上皮细胞样,多角形、梭形
提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式:菌株未知
培养方法
传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
生长条件:37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含酸钠。
存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
【培养指南】
小鼠正常骨髓细胞说明书对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
矢车菊素3O葡标准品 英文名称: CAS:7084244
渗透直径测定用灰黄霉素标准品 英文名称: CAS:126078
沙美特罗相关物质A标准品 英文名称: CAS:
沙相关物质H标准品 英文名称: CAS:870076725
色甘相关物质A标准品 英文名称: CAS:16150440
色氨相关物质B标准品 英文名称: CAS:1218344
色氨相关物质A标准品 英文名称: CAS:132685020
三乙标准品 英文名称: CAS:102716
三生相关物质A标准品 英文名称: CAS:
三氨络铂标准品 英文名称: CAS:13820912
三聚标准品 英文名称: CAS:108781
三氨喋啶相关物质C标准品 英文名称: CAS:19152933
三氨喋啶相关物质B标准品 英文名称: CAS:19375894
三氨喋啶相关物质A标准品 英文名称: CAS:1006231
赛庚啶相关物质A标准品 英文名称: CAS:256815
15150kDa精确分子量MARK 订购|咨询 进口/国产 5克
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小鼠正常骨髓细胞说明书产品规格:3×50ml
发货周期:1~3天
用途:
中性脂肪染色,主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着。
注意事项:
主要由苏丹红四号染液、苏木素染液、分化液等组成,需用冰冻切片,染色后脂肪呈猩红色,细胞核呈蓝色。
储存条件:4℃,避光,12个月
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文献和实验「没爹」小鼠来了!科学家只用 1 个卵细胞培育出健康小鼠,还可正常繁殖后代
。 首先,他们对来自父系的 2 个 ICRs 进行编辑,并将修饰后的孤雌囊胚植入到雌性小鼠子宫中。然而,他们并没有获得足月后代的发育,大多数胚胎在 12.5 天之前就已经死亡。基因定量分析结果显示,父系相关印迹基因的表达基本正常,但母系甲基化 ICRs 调控的印迹基因存在异常表达。 图片来源:PNAS 然后,他们将注意力转向了母系甲基化 ICRs。他们选择了 5 个母系甲基化 ICRs,先前的研究表明它们的异常与胚胎或产后致死或严重发育障碍有关。 在对卵母细胞的这些区域进行编辑后,他们还借助亚硫酸氢盐测序
正常 小鼠原代真皮纤维原细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:抗小鼠Fibronectin
如果动物品系从美国Charles River 引种的C57BL/6N,则有如下一个对应关系,仅供参考:雄性:体重(g) 日龄13~15g 24~2816~18g 29~3519~21g 36~4522~24g 45~63雌性:体重(g) 日龄13~15g 24~3116~18g 32~5219~21g 53~7722~24g 78~105
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