常见问题: 1. 背景较高。 可能是由于封闭液或洗涤液中出现沉淀或混浊。解决方法是参考使用说明,加热封闭液和洗涤液使封闭液和洗涤液完全溶解。 2. 出现斑点状背景。 可能是由于过长时间存放导致Streptavidin-HRP Conjugate中出现沉淀,解决方法是12000-14000g离心1分钟再吸取近液面的Streptavidin-HRP Conjugate。转膜时有气泡也会导致斑点状背景产生,解决方法是转膜时胶、膜、滤纸之间确保没有气泡。 3. 没有条带或信号很弱。 A. 探针标记效率太低,解决方法是检测探针标记效率,确保探针的标记效率较高。 B. 探针用量不足或样品量不足,解决方法是加大探针用量或加大样品用量。 C. 样品中待检测的核酸降解,解决方法是检测待检测的核酸样品是否出现降解,如降解则须制备新的样品。 D. 转膜效果不佳,解决方法是检查转膜的方法和步骤,最好使用预染的标准品作为转膜的对照。 E. 选择了不适当的膜,尽管不少情况下硝酸纤维素膜也可以完成检测,请优先选择带正电荷的尼龙膜。 F. 检测过程中膜干掉了,解决方法是确保检测过程中膜可以被液体覆盖或始终保持湿润。 G. 没有交联或交联效果不佳,解决方法是进行适当的交联,如果交联效果不佳则须检测交联的效率。 H. 洗涤液(5X)没有稀释就直接使用,请把洗涤液(5X)稀释至1X后再使用。 I. X光片曝光时间不足,解决方法是适当延长曝光时间。