pCMV-N-Myc

pCMV-N-Myc

pCMV-N-Myc是信裕生物自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Myc tag (Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Myc标签的序列，因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白，可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
      pCMV-N-Myc质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1–602
T3 promoter and T3 primer binding site	620–639
Myc tag	679–708
multiple cloning site	711–784
T7 promoter and T7 primer binding site	827–848
SV40 polyA signal	860–1243
f1 origin of ss-DNA replication	1381–1687
bla promoter	1712–1836
SV40 promoter	1856–2194
neomycin/kanamycin resistance ORF	2229–3020
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3021–3479
pUC origin	3608–4275

      pCMV-N-Myc质粒的图谱如下：

      pCMV-N-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:

Myc tag
SacI M E Q K L I S E E
651	GAGCTCCACC	GCGGTGGCGG	CCGCC ATG GA	GCAGAAACTC	ATCTCTGAAG
	CTCGAGGTGG	CGCCACCGCC	GGCGG TAC CT	CGTCTTTGAG	TAGAGACTTC
XmaI PstI
D  L SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI
701	AGGATCTG AG	CCCGGGCGGA	TCCAAGCTTC	TGCAGGAATT	CGATATCGTC
	TCCTAGAC TC	GGGCCCGCCT	AGGTTCGAAG	ACGTCCTTAA	GCTATAGCAG
BglII XhoI XbaI SpeI ApaI KpnI
751	GACAGATCTC	TCGAGTCTAG	AACTAGTGGG	CCCGGTACCT	TAATTAATTA
	CTGTCTAGAG	AGCTCAGATC	TTGATCACCC	GGGCCATGGA	ATTAATTAAT

      pCMV-N-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Myc)包括：

Afl II	Age I	Ahd I	Asc I	Bbs I	Bbv II	Blp I
Bsg I	BsiW I	BsmB I	BspM II	BsrG I	BssH II	Bst1107 I
BstE II	Eco47 III	Eco72 I	EcoN I	Esp I	Fse I	Nru I
PflM I	Pme I	Pml I	PpuM I	Psp1406 I	Sap I	Sca I
Spl I	Xca I

      pCMV-N-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Myc once)包括：

Nde I	CA`TA,TG	241		Apa I	G,GGCC`C	783
SnaB I	TAC|GTA	347		Pvu I	CG,AT`CG	861
Nhe I	G`CTAG,C	598		Bcl I	T`GATC,A	1015
Sac I	G,AGCT`C	656		Mun I	C`AATT,G	1108
Sac II	CC,GC`GG	663		Hpa I	GTT|AAC	1121
BstX I	CCAN,NNNN`NTGG	664		Mlu I	A`CGCG,T	1244
Not I	GC`GGCC,GC	669		Dra III	CAC,NNN`GTG	1474
Ear I	CTCTTC 7/10	693		Sfi I	GGCCN,NNN`NGGCC	2133
PspA I	C`CCGG,G	712		BseR I	GAGGAG 16/14	2176
Xma I	C`CCGG,G	712		Stu I	AGG|CCT	2179
Srf I	GCCC|GGGC	714		Cla I	AT`CG,AT	2198
Sma I	CCC|GGG	714		Kas I	G`GCGC,C	2357
BamH I	G`GATC,C	719		Nar I	GG`CG,CC	2358
Hind III	A`AGCT,T	725		Ehe I	GGC|GCC	2359
Pst I	C,TGCA`G	735		Bbe I	G,GCGC`C	2361
EcoR I	G`AATT,C	737		Msc I	TGG|CCA	2440
EcoR V	GAT|ATC	745		Tth111 I	GACN`N,NGTC	2476
Sal I	G`TCGA,C	749		BsrD I	GCAATG, 8	2591
Acc I	GT`MK,AC	750		Bsp1286 I	G,DGCH`C	2661
Bgl II	A`GATC,T	755		Rsr II	CG`GWC,CG	2874
PaeR7 I	C`TCGA,G	761		BsiC I	TT`CG,AA	3040
Xho I	C`TCGA,G	761		BstB I	TT`CG,AA	3040
Xba I	T`CTAG,A	767		Bsa I	GGTCTC 7/11	3347
Spe I	A`CTAG,T	773		HgiE II	ACCNNNNNNGGT-1/13	3687
Bsp120 I	G`GGCC,C	779		ApaL I	G`TGCA,C	3962

 

      pCMV-N-Myc质粒中对于插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：
      T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
      T7 primer(827-848): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
       pCMV-N-Myc的全序列信息：D2756 pCMV-N-Myc-seq.txt
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
XY-2756-1μg	pCMV-N-Myc	1μg
XY-2756-100μg	pCMV-N-Myc	100μg
—	说明书	1份

保存条件：
      -20℃保存。
注意事项：
      本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。