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- 信裕生物/XY-Bioscience
- XY-2722
- 进口/国产
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
pCMV-N-Flag
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存。
- 规格：
1μg;100μg
pCMV-N-Flag是信裕生物自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Flag标签的序列，因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白，可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-Flag质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Flag tag | 679-702 |
| multiple cloning site | 705-778 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 821-842 |
| SV40 polyA signal | 854-1237 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1375-1681 |
| bla promoter | 1706-1830 |
| SV40 promoter | 1850-2188 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2223-3014 |
| HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal | 3015-3473 |
| pUC origin | 3602-4269 |
pCMV-N-Flag质粒的图谱如下：
pCMV-N-Flag的多克隆位点的详细图谱如下：
| Flag tag | |||||||||||
| SacI M D Y K D D D D K | |||||||||||
| 651 | GAGCTCCACC | GCGGTGGCGG |
|
TTACAAGGAT |
|
||||||
| CTCGAGGTGG | CGCCACCGCC |
|
AATGTTCCTA |
|
|||||||
| XmaI PstI | |||||||||||
| SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII | |||||||||||
| 701 |
|
CGGATCCAAG | CTTCTGCAGG | AATTCGATAT | CGTCGACAGA | ||||||
|
GCCTAGGTTC | GAAGACGTCC | TTAAGCTATA | GCAGCTGTCT | |||||||
| XhoI XbaI ApaI | |||||||||||
| 751 | TCTCTCGAGT | CTAGAACTAG | TGGGCCCGGT | ACCTTAATTA | ATTAAGGTAC | ||||||
| AGAGAGCTCA | GATCTTGATC | ACCCGGGCCA | TGGAATTAAT | TAATTCCATG | |||||||
pCMV-N-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Flag)包括：
| Afl II | Age I | Ahd I | Asc I | Bbs I | Bbv II | Blp I |
| Bsg I | BsiW I | BsmB I | BspM II | BsrG I | BssH II | Bst1107 I |
| BstE II | Ear I | Eco47 III | Eco72 I | EcoN I | Esp I | Fse I |
| Nru I | PflM I | Pme I | Pml I | PpuM I | Psp1406 I | Sap I |
| Sca I | Spl I |
pCMV-N-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Flag once)包括：
| Nde I | CA`TA,TG | 241 | Pvu I | CG,AT`CG | 855 | |
| SnaB I | TAC|GTA | 347 | Bcl I | T`GATC,A | 1009 | |
| Nhe I | G`CTAG,C | 598 | Mun I | C`AATT,G | 1102 | |
| Sac I | G,AGCT`C | 656 | Hpa I | GTT|AAC | 1115 | |
| Sac II | CC,GC`GG | 663 | Mlu I | A`CGCG,T | 1238 | |
| BstX I | CCAN,NNNN`NTGG | 664 | Dra III | CAC,NNN`GTG | 1468 | |
| Not I | GC`GGCC,GC | 669 | Sfi I | GGCCN,NNN`NGGCC | 2127 | |
| PspA I | C`CCGG,G | 706 | BseR I | GAGGAG 16/14 | 2170 | |
| Xma I | C`CCGG,G | 706 | Stu I | AGG|CCT | 2173 | |
| Srf I | GCCC|GGGC | 708 | Cla I | AT`CG,AT | 2192 | |
| Sma I | CCC|GGG | 708 | Kas I | G`GCGC,C | 2351 | |
| BamH I | G`GATC,C | 713 | Nar I | GG`CG,CC | 2352 | |
| Hind III | A`AGCT,T | 719 | Ehe I | GGC|GCC | 2353 | |
| Pst I | C,TGCA`G | 729 | Bbe I | G,GCGC`C | 2355 | |
| EcoR I | G`AATT,C | 731 | Msc I | TGG|CCA | 2434 | |
| EcoR V | GAT|ATC | 739 | Tth111 I | GACN`N,NGTC | 2470 | |
| Sal I | G`TCGA,C | 743 | BsrD I | GCAATG, 8 | 2585 | |
| Acc I | GT`MK,AC | 744 | Bsp1286 I | G,DGCH`C | 2655 | |
| Bgl II | A`GATC,T | 749 | Rsr II | CG`GWC,CG | 2868 | |
| PaeR7 I | C`TCGA,G | 755 | BsiC I | TT`CG,AA | 3034 | |
| Xho I | C`TCGA,G | 755 | BstB I | TT`CG,AA | 3034 | |
| Xba I | T`CTAG,A | 761 | Bsa I | GGTCTC 7/11 | 3341 | |
| Spe I | A`CTAG,T | 767 | HgiE II | ACCNNNNNNGGT-1/13 | 3681 | |
| Bsp120 I | G`GGCC,C | 773 | ApaL I | G`TGCA,C | 3956 | |
| Apa I | G,GGCC`C | 777 |
pCMV-N-Flag质粒中对于插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：
T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(821-842): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-N-Flag的全序列信息：D2722 pCMV-N-Flag-seq.txt
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| XY-2722-1μg | pCMV-N-Flag | 1μg |
| XY-2722-001μg | pCMV-N-Flag | 100μg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验【求助】克隆100个已知序列的基因于带有绿色荧光蛋白的载体中需要多少时间和经费？
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