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- 详细信息
- 技术资料
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
21
- 英文名:
EAC
- 规格:
详见说明书
| 产品名称 | 小鼠艾氏腹水瘤细胞哪家好 |
| 种属 | EAC |
| 价格 | 来电可享受优惠 |
资源名称 小鼠艾氏腹水瘤细胞
种属:EAC
形态:淋巴母细胞样
模式菌株:未知
培养方法
培养基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生长特性:悬浮生长
收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况:
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。
小鼠艾氏腹水瘤细胞哪家好具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
醋甲地孕标准品 英文名称:Megestrol Acetate CAS:595335
甲相关物质A标准品 英文名称:Mefloquine Related Compound A CAS:
盐甲标准品 英文名称:Mefloquine Hydrochloride CAS:51773923
甲芬那甲芬那标准品 英文名称:Mefenamic Acid CAS:61687
甲羟松标准品 英文名称:Medrysone CAS:2668668
醋甲羟孕标准品 英文名称:Medroxyprogesterone Acetate CAS:71589
甲灭标准品 英文名称:Meclofenamate Sodium CAS:6385020
基水杨甲土霉素标准品 英文名称:Meclocycline Sulfosalicylate CAS:73816429
盐美克洛嗪标准品 英文名称:Meclizine Hydrochloride CAS:31884772
盐美加明标准品 英文名称:Mecamylamine Hydrochloride CAS:826391
甲菲宁标准品 英文名称:Mebrofenin CAS:78266065
甲达标准品 英文名称:Mebendazole CAS:31431397
标准品 英文名称:Mazindol CIV CAS:22232719
盐马普替林标准品 英文名称:Maprotiline Hydrochloride CAS:10347816
甘露糖标准品 英文名称:Mannose CAS:3458284
增氧灵 特价促销 英文名称:Calciumperoxide 含量:AR,99%
粘蛋白 特价促销 英文名称:Mucin 含量:BR,200u/g
粘胶质 特价促销 英文名称:Pectin 含量:试剂级,98%
粘胶质酶 特价促销 英文名称:Pectinase 含量:生物技术级,30u/mg
粘液素II 特价促销 英文名称:Mucin 含量:BR,200u/mg
樟脑 特价促销 英文名称:L()Camphorsulfonicacid 含量:AR,99%
长春新物 特价促销 英文名称:VCR 含量:USP级,88%,920u/mg
锗 特价促销 英文名称:Germanium 含量:AR,99.5%
锗试剂 特价促销 英文名称:Phenylfluorone 含量:高纯,65%
蔗糖酶 特价促销 英文名称:SucrosePhosphorylase 含量:超纯,99%
小鼠艾氏腹水瘤细胞哪家好产品规格:100T
发货周期:1~3天
NF-κB是一个多向性核转录调节因子,可调节细胞因子、趋化因子、粘附分子、生长因子、免疫受体、氧化应激相关酶、转录因子、急性时相蛋白等基因的表达,功能涉及相应的许多生理、病理过程。
DAPI 是一种蓝色核酸染料,优先染dsDNA,DAPI 表现为可集中结合在DNA 双链的AT 小沟,结合后的DAPI 荧光会发生20 倍增强。同时,DAPI 也可以结合RNA,与DNA 不同,一般认为DAPI 结合于RNA 的AU 区。DAPI/RNA 的复合体(500nm)有比DAPI/dsDNA复合体(460nm)更长的荧光波长。DAPI 是一种常用的多色荧光技术中的核复染剂。
NF-κβ作为一种广泛存在的转录因子,被激活由胞浆转入胞核,从而参与炎症反应、免疫反应、细胞凋亡、肿瘤发生等。可以将细胞核和NF-κβ分别用DAPI 和FITC 染色,可观察每个细胞是否发生NF-κβ核转位,并量化分析NFkB 核转位程度以及发生核转位细胞的比例。
C-jun 属于即早基因(immediate early genes,IEGs)成员之一。而即早基因是原癌基因家族成员,常在细胞生长、增殖、凋亡、创伤、应激等反应的早期出现表达变化。即早基因通常在细胞内作为第三信使,受信号通路调节后作用于核内调节靶基因的转录。
储存:4℃,有效期十二个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
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