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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
45
- 英文名:
FRTL-5
- 规格:
详见说明书
| 产品名称 | 大鼠甲状腺细胞哪家好 |
| 种属 | FRTL-5 |
| 价格 | 来电可享受优惠 |
资源名称 大鼠甲状腺细胞
种属:FRTL-5
类型:贴壁生长
形态:CM3-1培养液中,贴壁,成纤维细胞样,中间凸起、两端细长
分离基物:大鼠,甲状腺;自发永生;Fischer
提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式菌株:未知
培养方法
培养基:90% L-15+10%FBS
传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约1min取出。传代用12mL CM3-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分2~4皿培养;
生长条件:37℃,100%空气,CM3-1培养液。CM3-1培养液:90%L15+10%FBS。L15:L-15培养液,含谷氨酰胺
存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况:
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。
大鼠甲状腺细胞哪家好具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
布比卡相关物质B标准品 规格:50mg 英文名称:
环酰相关物质B标准品 规格:25mg 英文名称:
环酰相关物质D标准品 规格:25mg 英文名称:
色甘标准品 规格:500mg 英文名称:Cromolyn Sodium
乙二四乙铁标准品 规格:200mg 英文名称:Sodium Iron EDTA
3氨基标准品 规格:100mg 英文名称:
布芬标准品 规格:750mg 英文名称:Ibuprofen
顺铂标准品 规格:100mg 英文名称:Cisplatin
丁标准品 规格:25mg 英文名称:Sodium Butyrate
盐吗茚标准品 规格:500mg 英文名称:Molindone Hydrochloride
甘露 特价促销 英文名称:DMannitol 含量:BR,85%
甘油单油酯 特价促销 英文名称:Monoolein 含量:BR,32%
甘油激酶 特价促销 英文名称:Glycerokinase 含量:BR,5′d(NNNNNNNNNN)3′
甘油钙 特价促销 英文名称:Glycerolphosphatecalciumsalt 含量:CP
甘油三乙酯 特价促销 英文名称:Glyceryltriacetate 含量:CP
甘油三油醋 特价促销 英文名称:Glyceroltrioleate 含量:BR,97%
肝脂盐 特价促销 英文名称:Heparinsodiumsalt 含量:BR,15003000u/mg
肝素 特价促销 英文名称:Heparinlithium 含量:BR,0.5u/mg
杆菌肽锌 特价促销 英文名称:Bacitracinzinc 含量:BR,200u/mg,响尾蛇毒液
刚果红试纸 特价促销 英文名称:Congoredtestpaper 含量:BR,99%
大鼠甲状腺细胞哪家好Endoplasmic Reticulum Tracker Red产品规格:20μl
发货周期:1~3天
本探针是一种内质网红色荧光探针,可以用于活细胞内质网特异性荧光染色。本探针为采用Molecular Probes公司的BODIPY TR进行了荧光标记的glibenclamide,分子量为915.23。
Glibenclamide即glyburide,中文名为格列苯脲,是一种2型糖尿病治疗药物,可以结合主要定位在内质网上的sulphonylurea受体。因此荧光标记的glibenclamide就可以用作内质网特异性的荧光探针。
本探针对于细胞的毒性极低。而传统的DiOC6(3)对ER染色的同时也对细胞有一定的毒性。本探针呈红色荧光,检测时的大激发波长为587nm,大发射波长为615nm。
本探针按照后附的使用说明染色后,用甲醛等固定后染色效果可以被部分保留。本品提供了探针稀释液,使本探针的使用更加便捷。按照1:1000的比例稀释,可以配制20ml探针工作液;按照1:3000的比例稀释,可以配制60ml探针工作液。
储存条件:-20℃避光,有效期6个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
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文献和实验相关实验
大鼠甲状腺素 (T4) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 甲状腺素(T4) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠甲状腺素 (T4) 水平。用纯化的 大鼠甲状腺素 (T4) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 甲状腺素 (T4) 抗原,再与 HRP 标记的 甲状腺素 (T4) 抗体
1. Wistar 大鼠血细胞计数 2. SD 大鼠血细胞计数
培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
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