小鼠骨髓来源树突状细胞哪家好

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  • 上海谷研
  • GOY-N0018
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  • 2025年07月15日
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      上海谷研

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      35

    • 英文名

      DC2.4

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      详见说明书

    细胞生物学研究有以下几个方面。
    细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
    ①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
    ②生物膜与细胞器的研究。
    ③细胞骨架体系的研究。
    ④细胞增殖及其调控。
    ⑤细胞分化及其调控。
    ⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
    ⑦细胞的起源与进化。
    ⑧细胞工程。
    资源名称 小鼠骨髓来源树突状细胞哪家好
    种属:DC2.4

    类型:贴壁生长
    形态:CM2-1培养液中,贴壁,上皮样细胞,长梭形
    分离基物:LⅡ瘤株在615小鼠皮下移植后,取脾脏原代培养,传20代后鉴定:细胞呈多角形、梭形及不规则形,胞突呈分枝状,常有大小粗细不等的胞突;经鉴定证明是小鼠树突状肉瘤细胞;
    提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
    安全等级:1
    模式菌株:未知
    应用领域:615小鼠皮下移植100%成瘤
    培养方法
    传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约1.5min取出。传代用12mL CM2-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
    生长条件:37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养液,含谷氨酰胺。
    存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
    小鼠骨髓来源树突状细胞哪家好
    冻存培养基:
    冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
    1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
    2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
    培养细胞冻存方案:
    以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 
    1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
    2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
    3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
    4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
    注:离心速度和时间取决于细胞种类。
    5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
    6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
    7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低  1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
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    小鼠骨髓来源树突状细胞哪家好Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit产品规格:20次|50次

    发货周期:1~3天
    本试剂盒是用EGFP标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。一个包装的本试剂盒共可以检测20个样品。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。
    试剂盒组份:
    Annexin V-EGFP—————————100μl
    Annexin V-EGFP结合液——————12ml
    碘化丙啶染色液—————————220μl
    Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白,参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。
    Annexin V选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)。磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。
    用带有绿色荧光的荧光探针EGFP标记的Annexin V,即Annexin V-EGFP,就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。
    本试剂盒还提供了碘化丙啶染色液,碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现红色荧光。对于坏死细胞,由于细胞膜的完整性已经丧失,Annexin V-EGFP可以进入到细胞浆内,与位于细胞膜内侧的磷酯酰丝氨酸结合,从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。

    【培养指南】
    小鼠骨髓来源树突状细胞哪家好对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中

     

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