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大肠杆菌表达系统标准服务
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艾柏森
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文献和实验【转帖】教你一种简单、高效的提高重组蛋白质的诱导表达量的方法
相信如何提高目的重组蛋白的诱导表达量是很多同学在研究中都会遇到的问题。记得小编在读书的时候就经常在研究这个问题,泡了无数论坛,看了无数帖子,尝试过IPTG的诱导浓度、培养基成分、诱导温度、诱导时间,甚至让别的公司帮忙做密码子优化(将目的片段通过全基因合成的方式合成出来)。总的来说,提高IPTG浓度是可以提高目的蛋白的诱导表达量的,但一般也就用到1mM的浓度,再高对细胞有毒性; 培养基营养越丰富,表达量越高,所以如果追求表达量的话,就不要用LB培养基了,用自动诱导培养基吧; 诱导温度,温度越低
Nature 子刊:迈出基因组重编码制备抗病毒人类细胞系的第一步
杂的基因组工程。虽然本研究可以通过一次转染在单个克隆中实现多达 33 个基因位点编辑,但这还远远不够。为了使以 TAG 作为终止密码子必需基因或全部的基因,都可以转换为 TAA,作者在文章的讨论部分,提出了几种可能的优化工作框架的策略: 1) 基于 CBE 变体 (PMIDs:33247095,32345976,32424272)、引导编辑器 (PMIDs:31634902,34653350) 和 DdCBE (PMIDs: 32641830,35379961) 开发低脱靶、高编辑效率的新型碱基
还在没日没夜跑定量?教你一招不做实验也能预测基因表达水平的小妙招!
沿着 DNA 序列直观可视化 CAI 的变化。其他功能在 CAIcal 服务器主页面的左侧,还提供了几个访问其他相关程序或数据库的链接,包括 HEG-DB(高表达基因数据库)、HGT-DB(横向转移基因数据库),NCBI、Swiss-Prot 和 SGDB 数据库,基因预测、翻译、OPTIMIZER 密码子优化程序等,十分方便。1. HEG-DB 数据库收集了模式微生物的基因组中的高表达基因,并计算了它们的 CAI 值。2. 在线程序 OPTIMIZER 可用于预测和优化异源基因表达中基因的水平表达。具体
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